1993 Fiscal Year Annual Research Report

AIDS発症予防法の開発を目指したウイルス学的、免疫学的解析

Research Project

Project/Area Number	05044143
Research Institution	Hokkaido University
Principal Investigator	生田和良北海道大学, 免疫科学研究所, 教授 (60127181)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	藤井陽一名古屋大学, 医学部附属動物実験施設, 助手 (50165346) IAN M. Jones Natural Environment Research Council, Ins, Project Le
Keywords	HIV-1 / AIDS / nef / CD4 / T細胞 / 持続感染 / 単クローン抗体 / 遺伝子変異
Research Abstract	ヒト免疫不全ウイルス遺伝子(HIV)には、3つのウイルス構造蛋白質遺伝子、2つの転写調節遺伝子に加え、4つのアクセサリー遺伝子が存在する。このアクセサリー遺伝子産物の機能は、ウイルス複製時にはその必要性が認めらない。しかし、エイズを引き起こすレトロウイルスにのみ存在することから、複雑なエイズ病態の進行に関わると考えられていた。米国グループにより初めて、アクセサリー遺伝子のひとつ、nefが、エイズ発症に必須の遺伝子であることが、サル免疫不全ウイルス-サルの系で証明された。私達は、nef以外のアクセサリー遺伝子、vif、vpr、vpuの変異が、細胞傷害性の低下を招き、結果的には持続感染細胞を産生させることを見出した。この変異は、nef遺伝子の存在下でのみ誘導された。言い換えれば、nef遺伝子産物は持続感染する上で必須の何らかの機能を持つ蛋白質であることを示唆する結果が得られた。そこで、本研究の目的は、我が国と英国からのHIV分離株からのnef遺伝子をクローニングし、その発現産物の普遍的な機能を探ることを目的としてスタートした。クローニングのためのPCRプライマーをデザインし、日本分離株からは高率にPCR増幅でき、その発現にも成功した。しかし、同じプライマーを用いたにもかかわらず、英国分離株からはPCR増幅できなかった。nefは、高保存性と考えられていたが、少なくとも用いたプライマ領域では変異性が認められた。また、nef遺伝子産物の機能解析を行った結果、持続感染細胞表面にも一部発現していること、CD4陽性ヒトT細胞表面に結合し得ること、CD4陽性ヒトT細胞の増殖抑制能があること、少なくともvifとvprの変異誘導に何らかの機能を発現すること、等が明らかになった。これらの研究のため、Nef蛋白質に対するマウス単クローン抗体産生ハイブリドーマ株を48株作成した。これらの抗体の中には、ヒトT細胞と交叉反応するものも含まれていた。

Research Products

(17 results)

All Other

All Publications (17 results)

[Publications] Takuro Kimura: "Amplification of superoxide anion generation in phagocytic cells by HIV-1 infection" FEBS LETTERS. 326. 232-236 (1993)
[Publications] Kazuo Kumagai: "Increased anti-HIV-1 activity of CD4 CDR3-related synthetic peptides by scrambling and further structural modifications,including D-isomerization and dimerization" FEBS LETTERS. 330. 117-121 (1993)
[Publications] Masanori Kameoka: "Superoxide enhances the spread of HIV-1 infection by cell-to-cell transmission" FEBS LETTERS. 331. 182-186 (1993)
[Publications] Masahiko Kishi: "Persistently human immunodeficiency virus type 1-infected T cell clone expressing only doubly spliced mRNA exhibits reduced cell surface CD4 expression" Japan Journal Cancer Research. 84. 153-162 (1993)
[Publications] Takayuki Miyazawa: "The AP-1 binding site in the feline immunodeficiency virus long terminal repeat is not required for virus replication in feline T lymphocytes" Journal of General Virology. 74. 1240-1246 (1993)
[Publications] Kohji Ohki: "Characterization of a unique scrambled peptide derived form the CD4 CDR3-related region which shows substantial activity for blocking HIV-1 infection" Vaccine. 11. 682-686 (1993)
[Publications] Yoichi Fujii: "Evidence for the role of human immunodeficiency virus type 1 Nef protein as a growth inhibitor to CD4_+ T lymphocytes and for the blocking of the Nef function by anti-Nef antibodies" Vaccine. 11. 837-847 (1993)
[Publications] Yoichi Fujii: "Expression of human immunodeficiency virus type 1 Nef antigen on the surface of acutely and persistently infected human T cells" Vaccine. 11. 1573-1580 (1993)
[Publications] Masanori Kameoka: "Cytotoxic T lymhocyte response in mice induced by a recombinant BCG vaccination which produces an extracellular α antigen that fused with the human immunodeficiency virus type 1 envelope immunodominant domain in the V3 loop" Vaccine. 12. 153-158 (1994)
[Publications] Kohji Ohki: "Multiple effects of CD4 CDR3-related peptide derivatives showing anti-HIV-1 activity on HIV-1 gp120 functions" Vaccine. (in press).
[Publications] Yoshii Nishino: "In vivo induction of human immunodeficiency virus type 1-specific cytotoxic T lymphocytes and delayed-type hypersensitivity by a 23-amino acid peptide from the highly conserved region in major core pritein p24" Vaccine. (in press).
[Publications] 生田和良: "エイズウイルスワクチンの可能性 HIV Vaccine Trials" 北海道医学雑誌. 68. 603-608 (1993)
[Publications] 岸雅彦: "HIV重感染 HIV superinfection" 日本臨牀. 51. 598-603 (1993)
[Publications] 住谷雅大: "HIV vif、vpr、vpu 遺伝子-構造と機能-" 日本臨牀. 51. 63-67 (1993)
[Publications] 亀岡正典: "マクロファージとHIVの潜在" 免疫薬理. 11. 53-58 (1993)
[Publications] 中屋隆明: "HIV-最近の知見-" 小児科診療. 56. 1105-1111 (1993)
[Publications] 中屋隆明: "エイズウイルス(HIV)感染の分子的基盤-治療法開発の可能性-" 蛋白質核酸酵素. (印刷中). (1994)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

AIDS発症予防法の開発を目指したウイルス学的、免疫学的解析

Principal Investigator

生田 和良 北海道大学, 免疫科学研究所, 教授 (60127181)

Research Products

[Publications] Takuro Kimura: "Amplification of superoxide anion generation in phagocytic cells by HIV-1 infection" FEBS LETTERS. 326. 232-236 (1993)

[Publications] Kazuo Kumagai: "Increased anti-HIV-1 activity of CD4 CDR3-related synthetic peptides by scrambling and further structural modifications,including D-isomerization and dimerization" FEBS LETTERS. 330. 117-121 (1993)

[Publications] Masanori Kameoka: "Superoxide enhances the spread of HIV-1 infection by cell-to-cell transmission" FEBS LETTERS. 331. 182-186 (1993)

[Publications] Masahiko Kishi: "Persistently human immunodeficiency virus type 1-infected T cell clone expressing only doubly spliced mRNA exhibits reduced cell surface CD4 expression" Japan Journal Cancer Research. 84. 153-162 (1993)

[Publications] Takayuki Miyazawa: "The AP-1 binding site in the feline immunodeficiency virus long terminal repeat is not required for virus replication in feline T lymphocytes" Journal of General Virology. 74. 1240-1246 (1993)

[Publications] Kohji Ohki: "Characterization of a unique scrambled peptide derived form the CD4 CDR3-related region which shows substantial activity for blocking HIV-1 infection" Vaccine. 11. 682-686 (1993)

[Publications] Yoichi Fujii: "Evidence for the role of human immunodeficiency virus type 1 Nef protein as a growth inhibitor to CD4_+ T lymphocytes and for the blocking of the Nef function by anti-Nef antibodies" Vaccine. 11. 837-847 (1993)

[Publications] Yoichi Fujii: "Expression of human immunodeficiency virus type 1 Nef antigen on the surface of acutely and persistently infected human T cells" Vaccine. 11. 1573-1580 (1993)

[Publications] Masanori Kameoka: "Cytotoxic T lymhocyte response in mice induced by a recombinant BCG vaccination which produces an extracellular α antigen that fused with the human immunodeficiency virus type 1 envelope immunodominant domain in the V3 loop" Vaccine. 12. 153-158 (1994)

[Publications] Kohji Ohki: "Multiple effects of CD4 CDR3-related peptide derivatives showing anti-HIV-1 activity on HIV-1 gp120 functions" Vaccine. (in press).

[Publications] Yoshii Nishino: "In vivo induction of human immunodeficiency virus type 1-specific cytotoxic T lymphocytes and delayed-type hypersensitivity by a 23-amino acid peptide from the highly conserved region in major core pritein p24" Vaccine. (in press).

[Publications] 生田 和良: "エイズウイルスワクチンの可能性 HIV Vaccine Trials" 北海道医学雑誌. 68. 603-608 (1993)

[Publications] 岸 雅彦: "HIV重感染 HIV superinfection" 日本臨牀. 51. 598-603 (1993)

[Publications] 住谷 雅大: "HIV vif、vpr、vpu 遺伝子-構造と機能-" 日本臨牀. 51. 63-67 (1993)

[Publications] 亀岡 正典: "マクロファージとHIVの潜在" 免疫薬理. 11. 53-58 (1993)

[Publications] 中屋 隆明: "HIV-最近の知見-" 小児科診療. 56. 1105-1111 (1993)

[Publications] 中屋 隆明: "エイズウイルス(HIV)感染の分子的基盤-治療法開発の可能性-" 蛋白質 核酸 酵素. (印刷中). (1994)

生田和良北海道大学, 免疫科学研究所, 教授 (60127181)

[Publications] 生田和良: "エイズウイルスワクチンの可能性 HIV Vaccine Trials" 北海道医学雑誌. 68. 603-608 (1993)

[Publications] 岸雅彦: "HIV重感染 HIV superinfection" 日本臨牀. 51. 598-603 (1993)

[Publications] 住谷雅大: "HIV vif、vpr、vpu 遺伝子-構造と機能-" 日本臨牀. 51. 63-67 (1993)

[Publications] 亀岡正典: "マクロファージとHIVの潜在" 免疫薬理. 11. 53-58 (1993)

[Publications] 中屋隆明: "HIV-最近の知見-" 小児科診療. 56. 1105-1111 (1993)

[Publications] 中屋隆明: "エイズウイルス(HIV)感染の分子的基盤-治療法開発の可能性-" 蛋白質核酸酵素. (印刷中). (1994)