1993 Fiscal Year Annual Research Report
始原生殖細胞の増殖におけるチロシンキナーゼ型レセプターの役割
Project/Area Number |
05152009
|
Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
松居 靖久 東北大学, 加齢医学研究所, 助手 (40241575)
|
Keywords | c-Kit / Steel因子 / チロシンキナーゼ型レセプター / 始原生殖細胞 / 増殖因子 / トランスジェニックマウス / テラトーマ / セリン / スレオニンキナーゼ |
Research Abstract |
がん原遺伝子でチロシンキナーゼ型レセプターをコードするc-Kitと、そのリガンドのS1因子が、発生過程で起こる始原生殖細胞の増殖停止とテラトーマの発症にどの様に関与するかを調べるために、これらを過剰発現するトランスジェニックマウスを作ることを試みた。そのために、生殖細胞で特異的に発現するoct-3遺伝子のプロモーターにc-kitのcDNAを、生殖細胞やそのまわりの細胞などで発現するEF-1α遺伝子のプロモーターにS1因子cDNAをつないだキメラ遺伝子を作り、それぞれ受精卵に導入してトランスジェニックマウスを得た。現在これらのトランスジェニックマウスの生殖巣組織の観察と、始原生殖細胞の培養を試みている。 また始原生殖細胞の増殖制御に関係する新しいチロシンキナーゼ型レセプター遺伝子のクローニングを試みた。EG細胞のmRNAを材料に、キナーゼの保存配列に対するプライマーを使ってRT-PCRを行い、EG細胞や生殖巣などで特異的に発現する4種類のキナーゼ遺伝子(GCK1、2、3、4)をクローニングした。このうちGCK1、2は新しいセリン/スレオニンキナーゼを、GCK3はPolo like kinaseをコードし、またGCK4はトリv-rykと相同性のあるタンパク質をコードする事がわかった。さらにGCK2はcDNAライブラリーから、ほぼ全長をコードする3.4KbのcDNAを得、その配列から非レセプター型のセリン/スレオニンキナーゼをコードすることが明らかになった。今後、これらの遺伝子産物と生殖細胞の増殖、分化やテラトーマの発症との関連を、トランスジェニックマウスと遺伝子ターゲッティング法により解析する予定である。
|
-
[Publications] Pierce,D.F.: "Inhibition of mammary duct development but not alveolar outgrowth during pregnancy in MMTV-TGFB s223/225 transgenic mice" Denes & Development. 7. 2308-2317 (1993)
-
[Publications] Coffey,R.J.: "Acceleration of mammary neoplasia in virgin mice mammary tumor virus enhancer/promotor-transforming growthfactor α transgenic mice by 7,12-dimethylbenzanthracere" Cancer Research. (1994)
-
[Publications] 松居靖久: "始原生殖細胞由来の細胞株の胚幹細胞としての性質" 日本疾患モデル学会記録. 9. 9-14 (1993)
-
[Publications] 松居靖久: "始原生殖細胞株の樹立とその性質" Tissue Culture Research Communications. 12. 273-278 (1993)
-
[Publications] 松居靖久: "生殖細胞の癌,テラトーマの発生機構" 実験医学. 11. 713-716 (1993)
-
[Publications] 松居靖久: "マウス始原生殖細胞の培養" 組織培養. 19. 176-180 (1993)
-
[Publications] 松居靖久: "sl因子による始原生殖細胞の増殖制御機構" Medical Immunology. 26. 81-88 (1993)
-
[Publications] 松居靖久: "c-Kitとsl因子の発生過程における発現と機能" 実験医学. 11. 1686-1691 (1993)
-
[Publications] 松居靖久: "c-Kitによる細胞内情報伝達" 生化学. 65. 1317-1321 (1993)
-
[Publications] 松居靖久: "マウス始原生殖細胞の体外培養" 実験医学. 12. 123-130 (1994)
-
[Publications] 松居靖久: "生殖細胞の生成と増殖,分化" 細胞工学. (1994)