1993 Fiscal Year Annual Research Report

ヒストンデアセチラーゼ阻害剤トリコスタチンを用いた増殖関連遺伝子発現の解析

Research Project

Project/Area Number	05249207
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	吉田稔東京大学, 農学部, 助手 (80191617)
Keywords	ヒストンアセチル化 / 遺伝子発現 / 細胞周期
Research Abstract	我々はこれまで細胞周期のG1,G2期の進行を抑える物質としてトリコスタチンA(TSA)を見いだし、その標的分子がヒストンデアセチラーゼであることを明らかにしてきた。TSAは様々な細胞系で新たな蛋白質合成に依存して分化や形態の正常化を引き起こす。また、v-sisでトランスフォームした細胞の形態を正常化させる物質として報告のあったトラポキシン(TPX)が同酵素の不可逆阻害剤であること、TSAとほぼ同様の生物活性を示すことも明らかにした。一方、新たな細胞周期阻害剤の探索から低濃度でG1,G2の進行を抑えるだけでなく、srcやrasでトランスフォームした細胞の形態を正常化し、細胞内にアクチンケーブルを再形成させる物質としてラディシコールを単離し、その標的がsrc系チロシンキナーゼであることをも明らかにした。興味深いことにこれらはいずれも細胞の分化、G1,G2期停止、種々の腫瘍細胞での新たな蛋白質合成に依存したアクチン繊維の再形成など、極めて類似した形質を誘導する。したがってTSAとラディシコールはその一次標的は異なっても、同一遺伝子の発現を誘導する可能性が考えられた。そこで両者で共通に誘導される蛋白質を2次元電気泳動によって探索し、90kDaの細胞質蛋白質を見いだした。泳動位置からアクチン調節蛋白質の一つ、gelsolinである可能性が考えられたので免疫沈降などを行なったところ、gelsolinであることを確認した。定量解析の結果、HeLa細胞中TSAで18倍、ラディシコールで6倍の発現誘導が認められた。さらに形態変化との関連を調べるためgelsolin抗体を顕微注入したところ、形態変化が抑えられたことから、これらの阻害剤の効果はgelsolinの発現誘導を介している可能性が示唆された。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] T.Schlake et al.: "Gene expression within a chromatin domain:the role of core histone hyperacetylation." Biochemistry. 33(印刷中). (1994)
[Publications] K.Nishi et al.: "Leptomycin B targets a regulatory cascade of crml,a fission yeast nuclear protein,involved in control of higher order chromosome structure and gene expression." The Journal of Biological Chemistry. 269(印刷中). (1994)
[Publications] M.Kijima et al.: "Trapoxin,an antitumor cyclic tetrapeptide,is an irreversible inhibitor of mammalian histone deacetylase." The Journal of Biological Chemistry. 268. 22429-22435 (1993)
[Publications] S.Ikegami et al.: "Accumulation of multiacetylated forms of histones by trichostatin A and its developmental consequences in early starfish embryos." Roux's Archives of Developmental Biology. 202. 144-151 (1993)
[Publications] K.Nishi et al.: "Mating of the fission yeast occurs independently of pmdl gene product,a structural homolog of budding yeast STE6 and mammalian P-glycoproteins." Archives of Microbiology. 160. 162-165 (1993)
[Publications] K.Ueda et al.: "Functional expression of human P-glycoprotein in Schizosaccharomyces pombe." FEBS Letters. 330. 279-282 (1993)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

ヒストンデアセチラーゼ阻害剤トリコスタチンを用いた増殖関連遺伝子発現の解析

Principal Investigator

吉田 稔 東京大学, 農学部, 助手 (80191617)

Research Products

[Publications] T.Schlake et al.: "Gene expression within a chromatin domain:the role of core histone hyperacetylation." Biochemistry. 33(印刷中). (1994)

[Publications] K.Nishi et al.: "Leptomycin B targets a regulatory cascade of crml,a fission yeast nuclear protein,involved in control of higher order chromosome structure and gene expression." The Journal of Biological Chemistry. 269(印刷中). (1994)

[Publications] M.Kijima et al.: "Trapoxin,an antitumor cyclic tetrapeptide,is an irreversible inhibitor of mammalian histone deacetylase." The Journal of Biological Chemistry. 268. 22429-22435 (1993)

[Publications] S.Ikegami et al.: "Accumulation of multiacetylated forms of histones by trichostatin A and its developmental consequences in early starfish embryos." Roux's Archives of Developmental Biology. 202. 144-151 (1993)

[Publications] K.Nishi et al.: "Mating of the fission yeast occurs independently of pmdl gene product,a structural homolog of budding yeast STE6 and mammalian P-glycoproteins." Archives of Microbiology. 160. 162-165 (1993)

[Publications] K.Ueda et al.: "Functional expression of human P-glycoprotein in Schizosaccharomyces pombe." FEBS Letters. 330. 279-282 (1993)

吉田稔東京大学, 農学部, 助手 (80191617)