1993 Fiscal Year Annual Research Report

単一遺伝子病における組織特異的発現異常の研究

Research Project

Project/Area Number	05253216
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	服巻保幸九州大学, 遺伝情報実験施設, 教授 (90128083)
Keywords	グロビン遺伝子 / 遺伝性高胎児ヘモグロビン血症 / プロモーター / CCAATボックス / 個体発生 / トランンスジェニックマウス
Research Abstract	時期特異的な発現異常、また発現亢進に基づく単一遺伝病のモデルとして、遺伝性高胎児ヘモグロビン血症(HPFH)の解析をさらに進めた。まず我々が見いだしたHPFH変異はgammaグロビン遺伝子の遠位CCAAT box内-114C-Tであるが、この近傍には-117G-A,CCAAT boxを含む13bpの欠失変異が報告されている。そこで-114変異と共にこれらの変異を持つプロモーターをCAT遺伝子に連結し、K562細胞とKU812細胞に導入後、CAT活性を測定した。その結果、近位および遠位CCCAAT boxは胎児期は正に、また成体期には近位CCCAAT boxは正に、一方遠位CCCAAT boxは負に働いていることが示唆された。個体発生に伴う遺伝子発現の異常を検討するために、正常または変異gammaグロビン遺伝子とbetaグロビン遺伝子とをタンデムにつないだ遺伝子を用いてトランスジェニックマウスを作成し、グロビン遺伝子の発現を解析した。これによると、正常gammaグロビン遺伝子は胎生期13日でbetaグロビン遺伝子に発現をシフトするが、-114変異では高いまま維持されることがわかった。またK562細胞の核抽出液を用いたgel shift assayを行ない、上記3種類変異においてNF-E3の結合が低下していることを見いだした。さらにDNAase footprinting法、methylation interference法によりNF-E3とCP-1とが遠位CCAAT boxについて排他的な関係にあることを明らかにした。以上から胎児期では遠位CCAAT boxにCP-1が結合し、gammaグロビン遺伝子の発現をONにしているが、成体期には代わってNF-E3が結合し、これが近位CCAAT boxへのCP-1の結合も阻害しgammaグロビン遺伝子の発現を抑制しているものと考えられた。従って、HPFHでは近位CCAAT boxの変異のためにNF-E3の結合が抑制され、gammaグロビン遺伝子の発現が成体期でも維持されているものと推測された。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Iwaki,A.et al.: "A missense mutation in the proteolipid protein gene responsible for Pelizaeus-Merzbacer disease in a Japanese family." Human Molecular Genetics. 2. 19-22 (1993)
[Publications] Winichagoon,P.et al.: "Severity differences in beta-thalassemia/haemoglobin E syndrome:inplication of genetic factors" British Journal of Haematology. 83. 633-639 (1993)
[Publications] Katsube,T.et al.: "Human fetal-to-adult globin gene switching in transgenic mice:Persistent expression of the Ggamma-globin gene in the Japanese HPFH" Biochemical and Biophysical Research Communications. 194. 246-252 (1993)
[Publications] Komatsu,N.et al.: "Establishment and characterization of an erythropoietin-dependent subline,UT-7/Epo,derived from human leukemia cell lines,UT-7" Blood. 82. 456-464 (1993)
[Publications] Yuasa,I.et al.: "Pl〓Siiyama,A deficiency gene of alpha1-antitrypsin:Evidence for the occurrence in Western Japan" Japanese Journal of Human Genetics. 38. 185-191 (1993)
[Publications] Kurosawa,K.et al.: "A novel insertional mutation at exon Vll of the myelin proteolipid protein gene in Pelizaeus-Merzbacher disease" Human Molecular Genetics. 2. 2187-2189 (1993)
[Publications] 服巻保幸(分担): "臨床遺伝学III" 藤實彰一(診断と治療社), 643 (1993)
[Publications] 服巻保幸(分担): "遺伝子病入門" 木立淳 (南江堂), 263 (1993)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

単一遺伝子病における組織特異的発現異常の研究

Principal Investigator

服巻 保幸 九州大学, 遺伝情報実験施設, 教授 (90128083)

Research Products

[Publications] Iwaki,A.et al.: "A missense mutation in the proteolipid protein gene responsible for Pelizaeus-Merzbacer disease in a Japanese family." Human Molecular Genetics. 2. 19-22 (1993)

[Publications] Winichagoon,P.et al.: "Severity differences in beta-thalassemia/haemoglobin E syndrome:inplication of genetic factors" British Journal of Haematology. 83. 633-639 (1993)

[Publications] Katsube,T.et al.: "Human fetal-to-adult globin gene switching in transgenic mice:Persistent expression of the Ggamma-globin gene in the Japanese HPFH" Biochemical and Biophysical Research Communications. 194. 246-252 (1993)

[Publications] Komatsu,N.et al.: "Establishment and characterization of an erythropoietin-dependent subline,UT-7/Epo,derived from human leukemia cell lines,UT-7" Blood. 82. 456-464 (1993)

[Publications] Yuasa,I.et al.: "Pl〓Siiyama,A deficiency gene of alpha1-antitrypsin:Evidence for the occurrence in Western Japan" Japanese Journal of Human Genetics. 38. 185-191 (1993)

[Publications] Kurosawa,K.et al.: "A novel insertional mutation at exon Vll of the myelin proteolipid protein gene in Pelizaeus-Merzbacher disease" Human Molecular Genetics. 2. 2187-2189 (1993)

[Publications] 服巻保幸(分担): "臨床遺伝学III" 藤實彰一(診断と治療社), 643 (1993)

[Publications] 服巻保幸(分担): "遺伝子病入門" 木立淳 (南江堂), 263 (1993)

服巻保幸九州大学, 遺伝情報実験施設, 教授 (90128083)