1993 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト熱ショックタンパク質70(HSP70)遺伝子の発現調節と産物タンパク質の機能

Research Project

Project/Area Number	05268201
Research Institution	Hokkaido University
Principal Investigator	有賀寛芳北海道大学, 薬学部, 教授 (20143505)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	有賀早苗北海道大学, 医療技術短期大学部, 助教授 (90184283)
Keywords	hsp70 / c-myc / 転写制御 / DNA複製
Research Abstract	熱ショック遺伝子70(hsp70)遺伝子は癌遺伝子c-mycによる転写調節が古くから知られていたが、そのターゲット配列などほとんど不明のままであった。我々はc-mycタンパク質がDNA複製開始と転写の調節因子であることを明らかにしてきた。そこでhsp70遺伝子におけるDNA複製と転写調節においてc-mycとの関係を解析した。hsp70プロモーター-180塩基対付近に2カ所c-mycタンパク質複合体結合が結合し、その配列をHSPmycA,HSPmycBと名ずけた。in vivoで実際に機能しているDNA複製開始領域を同定したところ、このHSPmycA,HSPmycBを含む転写プロモーター領域と一致した。この領域を含むプラスミドは培養細胞で一過性、及びstable cell lineで自律複製し、この配列に塩基置換を導入したものはその活性がなかった。このことより、c-mycタンパク質複合体配列の複製における重要性とc-mycタンパク質の関与が明らかとなった。次にhsp70遺伝子のc-mycによる転写調節機構を解明するためにhsp70プロモーターの種々の変異株にルシフェラーゼレポーター遺伝子を接続し、c-mycとのコトランスフェクションの有無で検討した。c-mycとのコトランスフェクションのない状態、すなわちc-mycは定常状態で存在している場合はHSPmycB配列は極めて高い転写能を有していた。一方、c-mycとのコトランスフェクションすなわちc-mycが大過剰の場合は逆にHSPmycA,HSPmycBの存在の有無にかかわらず、基本的なTATA Boxが存在すると転写抑制を示した。このことはc-myc量が少ないG1期ではHSPmycB配列を介してのc-mycによる転写促進が働くが、細胞がS期に入りc-mycが多量に合成されるとc-mycタンパク質は転写複製開始複合体に作用して転写を抑制し、DNA複製をONとして複製へのと移行すると考えると興味深い。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Iguchi-Ariga,S.M.M.: "Identification of initiation region of DNA replication in murine immunoglobulin heavy chain gene and possible function of octamer motif as a putatibe DNA" Biochim.Biophys.Acta. 1172. 73-81 (1993)
[Publications] Saegusa,Y.: "Human Alu family stimulates DNA replication and transcription of SV40 system and identification of Alu binding protein." Biochim.Biophys.Acta. 1172. 274-282 (1993)
[Publications] Galli,I.: "Mammalian genomic sequences can substitute for the SV40 AT stretch in sustaining replication of the SV40." FEBS Lett.318. 335-340 (1993)
[Publications] Kakizaki,I.: "Cell cycle-dependent activation of human c-myc enhancer." Int.J.Onc.2. 657-661 (1993)
[Publications] Imamura,Y.: "Transcriptional regulation of the N-myc gene.Identification of positive regulatory element and its double- and single-stranded DNA binding protein." Biochim.Biophys.Acta. 1216. 273-285 (1993)
[Publications] Nishita,Y.: "Identification of the DNA binding region in human c-myc gene and its binding protein." Int.J.Onc.3. 701-706 (1993)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト熱ショックタンパク質70(HSP70)遺伝子の発現調節と産物タンパク質の機能

Principal Investigator

有賀 寛芳 北海道大学, 薬学部, 教授 (20143505)

Research Products

[Publications] Iguchi-Ariga,S.M.M.: "Identification of initiation region of DNA replication in murine immunoglobulin heavy chain gene and possible function of octamer motif as a putatibe DNA" Biochim.Biophys.Acta. 1172. 73-81 (1993)

[Publications] Saegusa,Y.: "Human Alu family stimulates DNA replication and transcription of SV40 system and identification of Alu binding protein." Biochim.Biophys.Acta. 1172. 274-282 (1993)

[Publications] Galli,I.: "Mammalian genomic sequences can substitute for the SV40 AT stretch in sustaining replication of the SV40." FEBS Lett.318. 335-340 (1993)

[Publications] Kakizaki,I.: "Cell cycle-dependent activation of human c-myc enhancer." Int.J.Onc.2. 657-661 (1993)

[Publications] Imamura,Y.: "Transcriptional regulation of the N-myc gene.Identification of positive regulatory element and its double- and single-stranded DNA binding protein." Biochim.Biophys.Acta. 1216. 273-285 (1993)

[Publications] Nishita,Y.: "Identification of the DNA binding region in human c-myc gene and its binding protein." Int.J.Onc.3. 701-706 (1993)

有賀寛芳北海道大学, 薬学部, 教授 (20143505)