1994 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝子工学的手法を用いた肺癌の転移診断と治療に関する研究
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05404047
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
山口 豊 千葉大学, 医学部, 教授 (80009448)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
飯笹 俊彦 千葉大学, 医学部・附属病院, 医員
斎藤 幸雄 千葉大学, 医学部・附属病院, 助手 (60261905)
柴 光年 千葉大学, 医学部, 助手 (20162620)
馬場 雅行 千葉大学, 医学部・附属病院, 助手 (00143305)
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| Keywords | 肺癌 / 転移 / 癌転移関連遺伝子 / マトリックスメタロプロティナーゼ / IV型コラゲナーゼ / 遺伝子治療 / アンチセンスオリゴヌクレオチド |
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| Research Abstract |
本研究は肺癌における転移関連遺伝子やその遺伝子産物(特にマトリックスメタロプロティナーゼ)の発現を、肺癌の細胞株および臨床例の組織において検討し、肺癌転移に関連した新しい遺伝子のクローニングを試みることにより、肺癌転移の分子機構の一部を明らかにし、肺癌の転移診断や遺伝子治療の一助となることを目的とし計画された。
癌転移の研究は急速に分子レベルで発展しており、腫瘍細胞より産生されるマトリックスメタロプロティナーゼ(MMP-2およびMMP-9)は、基底膜の主要構成成分であるIV型コラーゲンを破壊し、癌の転移や浸潤に重要な役割を果たすといわれている。本研究では、今年度ザイモグラム法やノーザンブロット法を用い、MMP-2およびMMP-9の発現が、さまざまな肺癌細胞株により、大きく異なることを明らかにした。現在MMP-2およびMMP-9の阻害酵素として話題になったTIMP-1およびTIMP-2の発現もあわせて検討している。また種々の経路により、これら細胞株をヌードマウスに移植し、肺癌細胞の転移浸潤能を検討している。
新しい癌転移関連遺伝子をクローニングするために必要な肺癌細胞株は、現在4ないし5株が樹立されたものの、転移好発株を得ることは困難であった。このため手術材料をもちい原発巣および転移巣から直接cDNAライブラリーを作成し、サブトラクション法を試みるよう材料を収集している。
平成6年度は初年度であった前年度の結果を踏まえ、癌転移関連遺伝子(とくにIV型コラゲナーゼ)の発現とその転移浸潤能を、肺癌細胞株をもちい分子レベルで明らかにした。今後さらに臨床例をもちいた検討を行うとともに、平成7年度はMMP-2、MMP-9に対するアンチセンスオリゴヌクレオチドを用い、腫瘍細胞の転移抑制効果を検討する予定である。またcDNAサブトラクション法をもちいた、新しい肺癌転移関連遺伝子は、そのクローニングには至らないものの、基礎的設定を変更し実験の方向性が明らかとなった。平成7年度はこのような変更点を考慮し、さらに実験法に検討を加え研究を遂行する予定である。
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