1994 Fiscal Year Annual Research Report

工業的利用をめざす二酸化炭素固定化酵素の構造-機能相関解析

Research Project

Project/Area Number	05453122
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	甲斐泰大阪大学, 工学部, 教授 (40029236)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	井上豪大阪大学, 工学部, 助手 (20263204) 金久展子大阪大学, 工学部, 助手 (20177538)
Keywords	X線構造解析 / 二酸化炭素固定化酵素 / ホウレンソウ / 2.0A分解能 / RuBisCo / ホスホエノールピルビン酸カルボキシラーゼ(PEPC) / 反射強度測定
Research Abstract	ポリエチレングリコールで精製、結晶化したホウレンソウRuBisCoについては筑波高エネルギー物理学研究所放射光実験施設で高分解能の回折強度のデータ測定に成功した。それによって得られたデータを用いて構造解析を行った結果、2.0A分解能で結果学的信頼度因子R=19.0%という精度での立体構造が得られた。得られた構造を、すでに2.4A分解能での解析が報告されている硫酸アンモニウムで精製結晶化したRuBiscoの構造と比較したところ、酵素活性を調節すると報告されたリジン残基の構造に違いが確認された。また、大腸菌PEPCについては、我々のこれまでの研究で結晶化の方法を確立しており、六方晶系のもの(P622,a=131A,c=325A)と斜方晶系のもの(I222,a=119A,b=252A,c=83A)とがあるが、斜方晶系の方が構造解析に適している。そこでNative結晶について回折強度測定を理学電気社製RAXIS-IICを用いて行い、3.41A分解能までの独立な反射9476個(収率87.6%)をRmerge7.43%という精度で測定した。引き続き構造解析に必要な重原子同型置換体結晶の作成を行っており、重原子同型置換体結晶が得られれば、X線回折強度を測定し、Native結晶のデータとあわせて構造解析する。また、単位格子が大きいことおよび迅速測定が可能であることから、放射光をりようしてNative結晶及び重原子同型置換体結晶のX線回折強度測定を行う予定である。

Research Products
(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] 井上豪: "Crystalllization and Preliminary X-Ray Studies on Pseudoazurin from Achromobacter cycloclastes IAM1013" Journal of Biochemistry. 114,. 761-762 (1993)
[Publications] 井上豪: "Refined Crystal Structure of Pseudoazurin from Methylobacterium extorquens AMI at 1.5A Resolution" Acta Crystallography. D50(3). 317-328 (1994)
[Publications] 井上豪: "Three-Dimensional Structure of Azurin from Achromobacter xylosoxidans NCIB11015 at 2.5A Resolution" Journal of Biochemistry. 116. 1193-1197 (1994)
[Publications] 原田繁春: "Crystallization and Preliminary X-ray Diffraction Studies of Curculinn A New Type of Sweet Protein Having Taste-modifying Action" Journal of Molecular Biology. 238. 286-287 (1994)
[Publications] 原田繁春: "Crystallization and Preliminary X-ray Studies of a Protease from Pseudomonas aeruginosa" Journal of Molecular Biology. 230. 1315-1316 (1993)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

工業的利用をめざす二酸化炭素固定化酵素の構造-機能相関解析

Principal Investigator

甲斐 泰 大阪大学, 工学部, 教授 (40029236)

Research Products

[Publications] 井上 豪: "Crystalllization and Preliminary X-Ray Studies on Pseudoazurin from Achromobacter cycloclastes IAM1013" Journal of Biochemistry. 114,. 761-762 (1993)

[Publications] 井上 豪: "Refined Crystal Structure of Pseudoazurin from Methylobacterium extorquens AMI at 1.5A Resolution" Acta Crystallography. D50(3). 317-328 (1994)

[Publications] 井上 豪: "Three-Dimensional Structure of Azurin from Achromobacter xylosoxidans NCIB11015 at 2.5A Resolution" Journal of Biochemistry. 116. 1193-1197 (1994)

[Publications] 原田 繁春: "Crystallization and Preliminary X-ray Diffraction Studies of Curculinn A New Type of Sweet Protein Having Taste-modifying Action" Journal of Molecular Biology. 238. 286-287 (1994)

[Publications] 原田 繁春: "Crystallization and Preliminary X-ray Studies of a Protease from Pseudomonas aeruginosa" Journal of Molecular Biology. 230. 1315-1316 (1993)

甲斐泰大阪大学, 工学部, 教授 (40029236)

[Publications] 井上豪: "Crystalllization and Preliminary X-Ray Studies on Pseudoazurin from Achromobacter cycloclastes IAM1013" Journal of Biochemistry. 114,. 761-762 (1993)

[Publications] 井上豪: "Refined Crystal Structure of Pseudoazurin from Methylobacterium extorquens AMI at 1.5A Resolution" Acta Crystallography. D50(3). 317-328 (1994)

[Publications] 井上豪: "Three-Dimensional Structure of Azurin from Achromobacter xylosoxidans NCIB11015 at 2.5A Resolution" Journal of Biochemistry. 116. 1193-1197 (1994)

[Publications] 原田繁春: "Crystallization and Preliminary X-ray Diffraction Studies of Curculinn A New Type of Sweet Protein Having Taste-modifying Action" Journal of Molecular Biology. 238. 286-287 (1994)

[Publications] 原田繁春: "Crystallization and Preliminary X-ray Studies of a Protease from Pseudomonas aeruginosa" Journal of Molecular Biology. 230. 1315-1316 (1993)