食品中のコレステロール分解を目的とした優良細菌群の育種研究

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05454073
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 室岡 義勝 広島大学, 工学部, 教授 (60029882)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山下 光雄 広島大学, 工学部, 助手 (40220347)
• Keywords: コレステロール / 乳酸菌 / 発酵食品 / 分子育種

Research Abstract

本研究は、伝統的な有用細菌種を育種するための効率の良い技術を開発し、コレステロールの分解能を付与した優良菌株を育種して、食品材料を処理し、食品中のコレステロール価の低減を目的とした基礎的研究を行おうとしたものである。本年度は以下のような研究を行った。
(1)世界の伝統醗酵食品、市販乳酸菌飲料等より乳酸菌群の分離:日本、インドネシア、フィリッピン、タイ、ネパール、エジプトの伝統的な醗酵食品より微生物を分離し、乳酸菌群の同定を行った。各国の伝統醗酵食品すべてより数種類の乳酸菌が分離された。市販乳酸菌飲料、整腸剤、市販パン酵母より、それぞれ8、3、7株の乳酸菌を分離した。(2)乳酸菌のプラスミドの検索:分離した乳酸菌のいくつかの株がさまざまなサイズのプラスミドを保持することを確認した。(3)乳酸菌への遺伝子導入のためのベクターの構築:まず、広宿種グラム陽性菌ベクターを用いて、乳酸菌株への効率的な遺伝子導入条件を、本年度購入した遺伝子導入装置を使用して検討している。(4)コレステロール分解酵素遺伝子のクローニングと構造解析:コレステロール分解活性の強い菌株を4株選択した。その内2株についてコレステロール転換酵素遺伝子のクローニングに成功した。この遺伝子の分離・解析に本年度購入した遺伝子増幅装置が威力を発揮している。現在、塩基配列の90%を終了した。

Research Products

• [Publications] Molnar,Istvan: "Bacterial cholesterol oxidases are able to act as flavoprotein-linked ketosteroid monooxygenases that catalyse the hydroxylation of cholesterol to 4-cholesten-6-ol-3-one" Molecular Microbiology. 7. 419-428 (1993)
• [Publications] Molnar,Istvan: "Nucleotide sequence analysis of a region upstream of the cholesterol oxidase-cytochrome P450 operon of Streptomyces sp.SA-COO revealing repeating units coding for putative transmembrane and DNA-binding proteins" Journal of Fermentation and Bioengineering. 76. 257-264 (1993)
• [Publications] Molnar,Istvan: "Helix-turn-helix DNA-binding motifs of Streptomyces - a cautionary note" Molecular Microbiology. 8. 783-784 (1993)
• [Publications] Molnar,Istvan: "Secretory production of homologous and heterologous proteins by recombinant Streptomyces:What has been accomplished?" Recombinant Microbes for Industrial and Agricultural Applications. 81-104 (1993)
• [Publications] Murakami,Katsuji: "Cloning and characterization of the gene encoding glutamate 1-semialdehyde 2,1-aminomutase,which is inlved in δ-aminolevulinic acid synthesis in Propionibacterium freudenreichii" Applied Environmental Microbiology. 59. 347-350 (1993)
• [Publications] Yamashita,Mitsuo: "Purification and characterization of monoamine oxidase from Klebsiella aerogenes" Journal of Fermentation and Bioengineering. 76. 289-295 (1993)
• [Publications] Murooka,Yoshikatsu: "Biotechnology in Agriculture and foresty" Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 15 (1993)
• [Publications] Murooka,Yoshikatsu: "Recombinant Microbes for Industrial and Agricultural Applications" Marcel Dkker,Inc.New York,U.S.A., 904 (1993)