1993 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
05454161
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Research Institution | The University of Tokushima |
Principal Investigator |
本川 雄太郎 徳島大学, 酵素科学研究センター, 教授 (40004585)
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Keywords | リポ酸 / リポ酸転移酵素 / グリシン開裂酵素系 / H-protein / lipoyl-AMP |
Research Abstract |
リポ酸はグリシン開裂酵素系のH-proteinやピルビン酸脱水素酵素複合体などのアシルトランスフェラーゼの補欠分子族として,それらの特定のリジン残基に結合している.ウシ肝ミトコンドリアからリポ酸をapo-H-proteinに結合させる反応を触媒するリポ酸転移酵素(lipoyltransferase)を分離した.ウシ肝ミトコンドリア抽出液をハイドロキシアパタイトカラムで分画すると,リポ酸転移酵素活性は2成分に分画される.低塩濃度で溶出されるものをlipoyltransferase I,より高塩濃度で溶出されるものをlipoyltransferase IIと名付けた.Lipoyltransferase IIは単一の蛋白質として精製されたが,lipoyltransferase Iは完全には精製されなかった. 両酵素とも類似の性質を示し,lipoyl-AMPとapo-H-proteinを基質とし,リポ酸はATP存在下でも基質とはならなかった.分子量はゲル濾過,SDS-PAGE両測定方法で共に40,000であり,最適pHは両酵素共7.8であった.反応はウシ血清アルブミンの添加により促進され,またリン酸を必要とする.Lipoyl-AMP及びapo-H-proteinに対するKm値は両酵素でほぼ等しく,Vmaxも類似の値を示した. 両精製酵素はlipoyl-AMP以外にhexanoyl-AMP,octanoyl-AMP,decanoyl-AMPも基質とし,それぞれのアシル基をapo-H-proteinに転移する反応を触媒した.
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Research Products
(1 results)