1993 Fiscal Year Annual Research Report

血管作動性ペプチドの臨床的意義に関する分子生物学的研究

Research Project

Project/Area Number	05454320
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	中尾一和京都大学, 医学部, 教授 (00172263)
Keywords	ナトリウム利尿ペプチド / 脳性ナトリウム利尿ペプチド / トランスジェニックマウス / 心筋症ハムスター / エンドセリン / エンドセリン受容体 / 転写調節 / エンドセリン受容体遺伝子
Research Abstract	I.ナトリウム利尿ペプチドファミリーに関する分子生物学的研究 1)BNP遺伝子過剰発現トランスジェニックマウス(TGM)の開発: 肝臓で発現するヒトSerum amyloid P componentのプロモーターに我々のクローニングしたマウスBNP遺伝子を連結し、複数系統のTGMを得た。マウスBNPの特異的RIAにて測定したTGMの血中BNP濃度は対照マウスの10〜100倍と著しく上昇しており、更に有意の血中cGMP濃度の上昇が認められた。これらのTGMの平均血圧は対照マウスと比べて明らかに低値を示した。このことより、BNPの慢性ホルモン作用が証明され、その治療薬としての長期投与の有用性が示唆された。 2)ハムスターBNPのcDNAクローニングと心筋症ハムスターにおける遺伝子発現の検討: ハムスター心臓から作成したcDNAライブラリーより、ハムスターBNPcDNA全長をクローニングし、32アミノ酸よりなるハムスターBNPの構造を明らかにした。32週齢の肥大型心筋症ハムスター及び拡張型心筋症ハムスターにおいて、心室のBNPmRNA濃度は対照の3倍以上に増加し、更に血中BNP濃度は7倍以上に上昇して100fmol/mlに達し、同じく上昇を認める血中ANP濃度(40fmol/ml)の3倍であった。このことより、心筋症ハムスターがヒト心疾患におけるBNPの病態生理的意義の検討に有用なモデルであることが明らかとなった。 II.エンドセリン(ET)受容体に関する分子生物学的研究 1)ET-A及びET-B受容体遺伝子の転写調節機構: ヒトET-A受容体遺伝子の5'隣接領域の5kb断片とレポーター遺伝子(ルシフェラーゼ)とのfusion plasmidを作製し、functional assayを行った。培養ラット糸球体メサンギウム細胞にトランスフェクションした結果、コントロールに比し約200倍のルシフェラーゼ活性の亢進を認めた。更に、この断片を5'端より欠失させて作製した種々のdeletion mutantsを用いた検討により、ATGコドンの上流0.6-0.1kbの領域にpositive regulatory elementsの存在が、また5-1.3kbの領域にnegative regulatory elementsの存在が明らかになり転写調節に関与するシス配列の存在が示唆された。ET-B受容体遺伝子についても同様の検討を行っている。

Research Products
(17 results)

All Other

All Publications (17 results)

[Publications] H.Arai,et al.: "The human endothelin-B receptor gene-structural organization and chromosomal assignment-." J.Biol.Chem.268. 3463-3470 (1993)
[Publications] G.Shirakami et al.: "Low doses of endothelin-I inhibit atrial natriuretic peptide secretion." Endocrinology. 132. 1905-1912 (1993)
[Publications] E.Morita et al.: "Increased plasma levels of brain natriuretic peptide in patients with acute myocardial infarction." Circulation. 88. 82-91 (1993)
[Publications] I.Kishimoto et al.: "Down-regulation of clearance receptor by natriuretic peptides via ANP-B receptor in vascular smooth muscle cells." Am.J.Physiol.265. H1373-H1379 (1993)
[Publications] H.Itoh et al.: "Brain natriuretic peptide levels in the umbilical venous plasma are elevated in fetal distress." Biology of the Neonate. 64. 18-25 (1993)
[Publications] K.Hasegawa et al.: "Ventricular expression of brain natriuretic peptide in hypertrophic cardiomyopathy." Circulation. 88. 372-380 (1993)
[Publications] H.Itoh et al.: "Brain natriuretic peptide is present in the human amniotic fluid and is secreted from amnion cells." J.Clin.Endocrinol.Metab.76. 907-911 (1993)
[Publications] H.Itoh et al.: "Plasma brain natriuretic peptide level in pregnant woman with pregnancy-induced hypertension." Obstetrics & Gynecology. 82. 71-77 (1993)
[Publications] T.Kaneko et al.: "C-type natriuretic peptide(CNP)is the major natriuretic peptide in human cerebrospinal fluid." Brain Research. 612. 104-109 (1993)
[Publications] G.Shirakami et al.: "Central action of C-type natriuretic peptide on vasopressin secretion in conscious rats." Neuroscience Letters. 159. 25-28 (1993)
[Publications] S.Suga et al.: "Cytokine-induced C-type natriuretic peptide(CNP)secretion from vascular endothelial cells-Evidence for CNP as a novel autocrine/paracrine regulator from endothelial cells-." Endocrinology. 133. 3038-3041 (1993)
[Publications] G.Shirakami et al.: "Positive end-expiratory pressure ventilation plasma atrial and brain natrivretic peptide levels in humans." Anesth Analy. 77. 1116-1121 (1993)
[Publications] N.Hama et al: "Detection of C-type natrivretic peptide(CNP)in human circulatation and marked increase of plasma CNP level in septic shock patients." Biochem.Biophys.Res.Commun.in press. (1994)
[Publications] N.Hama et al: "A monoclonal antibody to C-type natriuretic peptide-Preparation and application to radioimmunoassay and neutralization experiment-." J.Endocrinol.in press. (1994)
[Publications] Y.Ogawa,et al: "Molecular cloning of the cDNA and gene encoding mouse brain natriuretic peptide and generation of transgenic mice that overexpresses the brain natriuretic peptide gene." J.Clin.Invest.in press. (1994)
[Publications] H.Itoh et al.: "In Central Neural Mechanisms in Cardiovascular Regulation volume 2 edited by G.Kunos and J.Ciriello." Birkhauser Publishers,Boston., 266-279 (1993)
[Publications] Y.Shimada et al.: "Recent Advances in Diseases of the Esophagus" Springer-Verlag, 668-672 (1993)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

血管作動性ペプチドの臨床的意義に関する分子生物学的研究

Principal Investigator

中尾 一和 京都大学, 医学部, 教授 (00172263)

Research Products

[Publications] H.Arai,et al.: "The human endothelin-B receptor gene-structural organization and chromosomal assignment-." J.Biol.Chem.268. 3463-3470 (1993)

[Publications] G.Shirakami et al.: "Low doses of endothelin-I inhibit atrial natriuretic peptide secretion." Endocrinology. 132. 1905-1912 (1993)

[Publications] E.Morita et al.: "Increased plasma levels of brain natriuretic peptide in patients with acute myocardial infarction." Circulation. 88. 82-91 (1993)

[Publications] I.Kishimoto et al.: "Down-regulation of clearance receptor by natriuretic peptides via ANP-B receptor in vascular smooth muscle cells." Am.J.Physiol.265. H1373-H1379 (1993)

[Publications] H.Itoh et al.: "Brain natriuretic peptide levels in the umbilical venous plasma are elevated in fetal distress." Biology of the Neonate. 64. 18-25 (1993)

[Publications] K.Hasegawa et al.: "Ventricular expression of brain natriuretic peptide in hypertrophic cardiomyopathy." Circulation. 88. 372-380 (1993)

[Publications] H.Itoh et al.: "Brain natriuretic peptide is present in the human amniotic fluid and is secreted from amnion cells." J.Clin.Endocrinol.Metab.76. 907-911 (1993)

[Publications] H.Itoh et al.: "Plasma brain natriuretic peptide level in pregnant woman with pregnancy-induced hypertension." Obstetrics & Gynecology. 82. 71-77 (1993)

[Publications] T.Kaneko et al.: "C-type natriuretic peptide(CNP)is the major natriuretic peptide in human cerebrospinal fluid." Brain Research. 612. 104-109 (1993)

[Publications] G.Shirakami et al.: "Central action of C-type natriuretic peptide on vasopressin secretion in conscious rats." Neuroscience Letters. 159. 25-28 (1993)

[Publications] S.Suga et al.: "Cytokine-induced C-type natriuretic peptide(CNP)secretion from vascular endothelial cells-Evidence for CNP as a novel autocrine/paracrine regulator from endothelial cells-." Endocrinology. 133. 3038-3041 (1993)

[Publications] G.Shirakami et al.: "Positive end-expiratory pressure ventilation plasma atrial and brain natrivretic peptide levels in humans." Anesth Analy. 77. 1116-1121 (1993)

[Publications] N.Hama et al: "Detection of C-type natrivretic peptide(CNP)in human circulatation and marked increase of plasma CNP level in septic shock patients." Biochem.Biophys.Res.Commun.in press. (1994)

[Publications] N.Hama et al: "A monoclonal antibody to C-type natriuretic peptide-Preparation and application to radioimmunoassay and neutralization experiment-." J.Endocrinol.in press. (1994)

[Publications] Y.Ogawa,et al: "Molecular cloning of the cDNA and gene encoding mouse brain natriuretic peptide and generation of transgenic mice that overexpresses the brain natriuretic peptide gene." J.Clin.Invest.in press. (1994)

[Publications] H.Itoh et al.: "In Central Neural Mechanisms in Cardiovascular Regulation volume 2 edited by G.Kunos and J.Ciriello." Birkhauser Publishers,Boston., 266-279 (1993)

[Publications] Y.Shimada et al.: "Recent Advances in Diseases of the Esophagus" Springer-Verlag, 668-672 (1993)

中尾一和京都大学, 医学部, 教授 (00172263)