1993 Fiscal Year Annual Research Report

血液幹細胞cDNAライブラリーからの自己複製因子受容体のクローニング

Research Project

Project/Area Number	05454333
Research Institution	Kumamoto University
Principal Investigator	須田年生熊本大学, 医学部, 教授 (60118453)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山口直人熊本大学, 医学部, 助手 (00166620) 岩間厚志熊本大学, 医学部, 助手 (70244126)
Keywords	血液幹細胞 / 受容体型チロシンキナーゼ / TIE遺伝子 / TEK遺伝子 / STK / RON遺伝子
Research Abstract	我々は、骨髄から分離した血液幹細胞群の遺伝子発現をRT-PCR法により検索し、新たなレセプター型チロシンキナーゼ遺伝子である、TIE,TEK遺伝子をクローニングした。両者は、全体で、46%の相同性を示した。これらの遺伝子は、正常幹細胞、前駆細胞に強く発現されていることを確認した。これらの受容体に対する結合因子は、幹細胞の増殖にかかわるものと期待される。その後、血液幹細胞特異的と考えられたこれらの分子は、血管内皮細胞およびその前駆細胞にも発現されていることが明かとなった。したがって、幹細胞/ストロマ細胞の共通祖先細胞に、アプローチすることも可能になっている。一方、STK/RONは、MET,SEAに相同性が高く、血液細胞特異的に発現されていることが分かった。細胞外ドメインの短いほうの発現が主であり点が、他の受容体と異なる。また、STK分子C末端のペプチドに対するポリクローナル抗体を作成し、検討したところ、分子量約160KDのSTK蛋白が、血清添加により、リン酸化されるのが確認された。今後、この方法を用いて、各種細胞培養上清を検討し、結合因子の同定を試みたい。当初、自己複製因子受容体を、血液幹細胞cDNAライブラリーから、クローニングする予定であったが、標的をチロシンキナーゼ遺伝子に限ったため、幹細胞からのRT-PCR法によるクローニングと未分化細胞株cDNAライブラリーの利用で、上記のような成果を得た。しかしながら、今後、幹細胞の増殖分化を、より包括的に把握するためには、幹細胞cDNAライブラリーは、必須であり、PCR法によらない方法でその作製を試みる予定である。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Iwama A: "Characterization of murine RON receptor tyrosine kinase gene isolated from enriched hematopoietic stem cells." Blood. (in press). (1994)
[Publications] Sakano S: "Molecular cloning of a novel non-receptor tyrosine kinase,HYL(hematopoietic concensus tyrosine-lacking kinase)." Oncogene. (in press). (1994)
[Publications] Gunji Y et al.: "Human primitive hemopoietic progenitor cells are more enriched in KIT^<low> cells than KIT^<high> cells." Blood. 82. 3283-3289 (1993)
[Publications] Iwama A: "Molecular cloning and characterization of mouse TIE and TEK receptor tyrosine kinase genes and their expression in hematopoietic stem cells." Biochem Biophy Res Comm. 195. 301-309 (1993)
[Publications] Miura N: "Stem cell factor and lL-6preferentially support the proliferation of kit-positive hemopoietic proqenitors rather than their differentiation." Exp Hematol. 21. 143-149 (1993)
[Publications] Okada S: "Sequential analysis of hematopoietic reconstitution achieved by transplantation of hematopoietic stem cells." Blood. 81. 1720-1725 (1993)
[Publications] 須田年生: "免疫1993-94" 中山書店, 221 (1993)
[Publications] 須田年生: "Annual Review 血液 1994" 中外医学社, 268 (1994)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

血液幹細胞cDNAライブラリーからの自己複製因子受容体のクローニング

Principal Investigator

須田 年生 熊本大学, 医学部, 教授 (60118453)

Research Products

[Publications] Iwama A: "Characterization of murine RON receptor tyrosine kinase gene isolated from enriched hematopoietic stem cells." Blood. (in press). (1994)

[Publications] Sakano S: "Molecular cloning of a novel non-receptor tyrosine kinase,HYL(hematopoietic concensus tyrosine-lacking kinase)." Oncogene. (in press). (1994)

[Publications] Gunji Y et al.: "Human primitive hemopoietic progenitor cells are more enriched in KIT^<low> cells than KIT^<high> cells." Blood. 82. 3283-3289 (1993)

[Publications] Iwama A: "Molecular cloning and characterization of mouse TIE and TEK receptor tyrosine kinase genes and their expression in hematopoietic stem cells." Biochem Biophy Res Comm. 195. 301-309 (1993)

[Publications] Miura N: "Stem cell factor and lL-6preferentially support the proliferation of kit-positive hemopoietic proqenitors rather than their differentiation." Exp Hematol. 21. 143-149 (1993)

[Publications] Okada S: "Sequential analysis of hematopoietic reconstitution achieved by transplantation of hematopoietic stem cells." Blood. 81. 1720-1725 (1993)

[Publications] 須田年生: "免疫1993-94" 中山書店, 221 (1993)

[Publications] 須田年生: "Annual Review 血液 1994" 中外医学社, 268 (1994)

須田年生熊本大学, 医学部, 教授 (60118453)