1994 Fiscal Year Annual Research Report
血液幹細胞cDNAライブラリーからの自己複製因子受容体のクローニング
Project/Area Number |
05454333
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Research Institution | Kumamoto University School of Medicine |
Principal Investigator |
須田 年生 熊本大学, 医学部, 教授 (60118453)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山口 直人 熊本大学, 医学部, 助教授 (00166620)
岩間 厚志 熊本大学, 医学部, 助手 (70244126)
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Keywords | 血液幹細胞 / 受容体型チロシンキナーゼ / STK / RON / MSP / TIE / TEK / HTK |
Research Abstract |
われわれは、幹細胞の自己複製因子を探索する目的で、血液幹細胞に発現される受容体型チロシンキナーゼの同定を行った。RT-PCR法により以下の受容体がクローニングされ、それぞれ解析を進めた。 1)STK/RON:Hepatocyte Growth Factor(HGF)の受容体であるc-metに類似した受容体で、35kDaα鎖と、キナーゼドメインをもつ140kDaβ鎖のヘテロダイマーからなる。 キナーゼドメインの自己リン酸化、および結合反応より、macrophage stimulating protein(MSP)が結合因子であることが明かになった。STKに対する抗体を作成して、FACS,免疫染色により検討したところ、腹腔マクロファージ、破骨細胞、赤血球系細胞株に発現していることが明かとなった。MSPのin vitroにおける幹細胞への作用は不明である。 2)TIE及びTEK:細胞外に免疫グロブリン、EGF,フィブロネクチン様構造をもつ受容体型チロシンキナーゼである。TIEに対するモノクローナル抗体を作成して、FACSによる検討をすると,TIEは、CD34陽性細胞(なかでも、CD38陰性の未分化幹細胞)、CD19,CD20陽性のB細胞に発現していることが明かとなった。この結合因子は、幹細胞に作用すると考えられるが、まだ同定できていない。 3)HTK:HTKは、Ephファミリーに属する。その多くは、神経細胞に優勢に発現しているが、HTKは、例外的で、CD34陽性細胞に発現していることを明かにした。さらに、結合因子を、同定することができたが、生理活性に関しては、現在検討中である。
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[Publications] Sakano S: "Molecular cloning of a novel non-receptor tyrosine kinase,Hyl." Oncogene. 9. 1155-1161 (1994)
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[Publications] Muroi K: "Expression of sialosyl-Tn in colony forming unit-erythroid,erythroblasts,B cells and subset of CD4+ cells." Blood. 83. 84-91 (1994)
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[Publications] Iwama A: "Molecular cloning of a novel receptor tyrosine kinase gene,STK,dertved from enriched hematopoietic stem cells." Blood. 83. 3160-3169 (1994)
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[Publications] Hamaguchi I: "Characterization of mouse non-receptor tyrosine kinase gene,HYL." Oncogene. 9. 1155-1161 (1994)
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[Publications] Sakamoto O: "Interleukin-13 selectively suppress the growth of human macrophage progenitors at the late stage." Blood. (in press).
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[Publications] Wang M-H: "The murine Stk gene product,a tiansmembrane protein tyrosine kinase,is a receptor for macrophage stimulating protein" Proc Natl Acad Sci USA. (in press).
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[Publications] Gunji Y & Suda T: "Hematopoietic stem cells" Marcell Dekkei, 680 (1995)