1994 Fiscal Year Annual Research Report
脳腫瘍の化学療法における効果増強に関する分子生物学的解析
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05454392
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| Research Institution | Akita University |
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Principal Investigator |
峯浦 一喜 秋田大学, 医学部, 助教授 (70134103)
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| Keywords | 脳腫瘍 / 化学療法 / DNA損傷回復酵素 / 治療効果増強 / 分子生物学 / mRNA / DNA |
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| Research Abstract |
1.O^6-Methylguanine-DNA methyltransferase(MGMT)不活化剤によるchloroethylnitrosourea(CENU)効果増強
2.O^6-Alkylguanine誘導体を合成し,10〜100μM濃度で2時間前処理後にACNUを2時間反応させ,MTT法で培養細胞(HeLa S3細胞と脳腫瘍細胞)における殺細胞効果を測定した。ACNU抵抗性細胞においてO^6-benzylguanine,O^6-(p-methylbenzyl)guanine,O^6-(p-chlorobenzyl)guanineの前処理によってACNUの殺細胞効果が2倍以上(最大90倍)に増強された.これに対して,O^6-methylguanine,O^6-methylhypoxanthine,およびO^6-benzylhypoxanthineの10〜100μM濃度でACNUの効果は増強されず,N^2-acethyl-O^6-benzylguanineとN^2-benzylguanineによる増強効果も認められなかった.ACNU効果増強のためにMGMT不活化剤として,O^6-benzyl基のほかに2位アミノ基が効果増強に重要な役割を持つことが明らかにされた.
2.ヒト脳腫瘍組織におけるMGMT mRNA発現
脳腫瘍では摘出標本量が限られるので,MGMT cDNA(pKT107)から制限酵素PstIで切断して331 base pairsのpKW100を作成し,これをプローブとして脳腫瘍細胞のMGMT mRNA発現量を解析した.40例のヒト脳腫瘍組織のMGMT活性は,髄膜腫や神経鞘腫の良性腫瘍で高値であり,グリオーマ(悪性脳腫瘍)で比較的低値を示した。グリオーマのうちほぼ半数の症例でU138細胞(高活性細胞)の20%以下であり,mRNAの発現量に基づいたCENUの選択的化学療法の指標の妥当性が示唆された.
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[Publications] Mineura K: "O^6-Methylguanine-DNA methyltrans ferase activity in cerebral gliomas.A guidance for nitrosourea treatment 3" Acta Oncologica. 33. 29-32 (1994)
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[Publications] Mineura K: "Perfusion and metabolism in predicting the survival of patients with cerebral gliomas." Cancer. 73. 2386-2394 (1994)
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[Publications] Mineura K: "Potential of O^6-methylguanime or O^6-benzylgnanine in the enhancement of chloroethyl introsomen cytotoxicity on brain tumors" Acta Neuro Chirurgica. 128. 13-20 (1994)
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[Publications] Mineura K: "Enhancement of ACNU cytotoxicity by pretreatment with O^6-methylguanine in ACNO-resistant brain tumors" Journal of Neurooncology. 19. 51-59 (1994)
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[Publications] Izumi I: "Establishment of two cell lines derived from human glioblastomas" Huiman Cell. 7. 101-105 (1994)
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[Publications] Mineura K: "Enhancing effect of O^6-alkylguanine derivatives on chloroethylnitrosourea cytotoxicity toward tumor cells" International Journal of Cancer. 58. 706-712 (1994)
