1993 Fiscal Year Annual Research Report
唾液腺開口分泌部位決定物質の同定とそれによって惹起する膜融合の分子機構
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05454508
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| Research Institution | Asahi University |
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Principal Investigator |
亀山 泰永 朝日大学, 歯学部, 助教授 (50161245)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
愼 順玉 朝日大学, 歯学部, 助手 (30226336)
神谷 真子 朝日大学, 歯学部, 助手 (80181907)
八代 耕児 朝日大学, 歯学部, 講師 (50182316)
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| Keywords | ラット耳下腺 / 開口分泌 / 分泌顆粒 / 腺腔側形質膜 / 基底膜側形質膜 / 1,2-ジアシル-sn-グリセロール / 低分子量GTP結合タンパク質 / rabタンパク質ファミリー |
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| Research Abstract |
ラット耳下腺細胞由来の各オルガネラからなるin vitro分泌モデル系(Biochim.Biophys.Acta 1116(1992)104-111)を用い、開口分泌時の膜変化、およびその動的変化と分泌との機能相関を解析するためには高純度に精製したオルガネラを用いる必要がある。現在までに、分泌顆粒に関してほぼ単一でインタクトな顆粒を得ているが、分泌顆粒の融合相手の腺腔側形質膜(apical plasma membrane)についても純度の高いものが必要であり、その精製から開始した。その結果、形質膜としてはいうに及ばず、基底膜側形質膜(basolateral plasma membrane)の混入も少ない腺腔側形質膜の調製に成功した。これによってこの形質膜に局在する特異的ホスホリパーゼA_2、ホスホリパーゼD、およびホスファチジン酸ホスファターゼの存在が示唆できた。これらの結果は、in vitro分泌モデル系での遊離脂肪酸、1,2-ジアシル-sn-グリセロールによるアミラーゼ分泌のそれぞれ抑制、亢進と一致し、両者が開口分泌部位での分泌制御物質の一つであることが明らかとなった。それぞれの物質の作用機構、およびそれらの生成を司る酵素の活性調節機構の解明が今後の課題として残る。一方、最近、小胞分泌過程を制御している物質として低分子量GTP結合タンパク質(G-タンパク質)(rabタンパク質ファミリー)が存在する。その中の一つであるYeast SEC4タンパク質とアミノ酸組成で40%、相同性で60%を示す低分子量G-タンパク質の抗体と反応する低分子量G-タンパク質が、上述の唾液腺細胞由来の精製分泌顆粒膜中に存在することを明らかにできた。このタンパク質の分泌機能への関与の解明、さらにそのエフェクター、アクセプタータンパク質の検索が今後の問題となった。
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[Publications] Akira Mori: "Analysis of membrane phospholipid and its fatty acid compositions in salivary glands of young female rats" Japanese Journal of Oral Biology. 35. 93-97 (1993)
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[Publications] Koji Yashiro: "Compositions of fatty acid in 1,2-diacylglycerol,phosphatidic acid,triacylglycerol,and nonesterified fatty acid in rat submandibular and sublingual salivary glands" Japanese Journal of Oral Biology. 35. 205-212 (1993)
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[Publications] Yutaka Yokota: "Regulation of phospholipid metabolism and its functional relations to secretory exocytosis in rat salivary glands" Dentistry in Japan. (in press). (1993)
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[Publications] Sun-OK Shin: "Characterization of microsomal long-chain acyl-CoA hydrolase activity in the rat submandibular gland" International Journal of Biochemistry. (in press). (1994)
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[Publications] Koji Yashiro: "Changes in microsomal lysophospholipid acyltransferase activity are correlated with gland enlargement induced by chronic administration of isoproterenol in rat parotid gland" Journal of Biochemistry. (in press). (1994)
