1994 Fiscal Year Annual Research Report
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05454641
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| Research Institution | KYUSHU UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
大島 靖美 九州大学, 理学部, 教授 (90037606)
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| Keywords | mRNA / 核外輸送 / 分裂酵母 / in situ hybridization / コスミドライブライ- / ポリA / 温度感受性変異株 |
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| Research Abstract |
1)oligo dTのin situ hybridizationにより、制限温度においてポリA-RNA(またはその前駆体)が核に蓄積することが見出されていた数種類の変異株につき、成長のts性の相補性検定を行った。この結果少なくとも3つのグループがあることが示された。グループ1(ts60,S2)、グループ2(S22)、その他(H1,H6)。H1とH6相互については調べていない。
2)pDB248をベクターとする野性型ゲノムライブラリーにより、H6株のts欠損を回復する形質転換体が昨年度得られていた。これから得られたDNAを大腸菌でクローン化し、長期間に渡って解析したが、結局確かに形質転換を行うプラスミドが回収できなかった。欠失、再編成等が起こってしまったためかも知れない。しかし、コスミドpSS10をベクターとするライブラリーによっては形質転換を行うコスミド(C-5)が得られて、マッピングを行った。H1については同じコスミドライブラリーから形質転換体は得られたが、コスミドが回収できなかった。
3)成長及びポリA-RNAの蓄積についてS22を野性型にもどすコスミドクローン♯(インサート32kb)が得られた。この中の8kb断片が少なくとも成長のts性を相補することがわかった。含まれる遺伝子を解析する予定である。
4)S22、ts60、WTにつきポリAの長さの分布を調べたが、これらの間で有意な差はなかった。
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