1993 Fiscal Year Annual Research Report

始原生殖細胞機能保持細胞株の樹立と発生工学への応用

Research Project

Project/Area Number	05454649
Research Institution	Tohoku University
Principal Investigator	松居靖久東北大学, 加齢医学研究所, 助手 (40241575)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	矢内信昭東北大学, 加齢医学研究所, 助手 (80200525)
Keywords	始原生殖細胞 / 配偶子 / トランスジェニックマウス / 増殖因子 / e-Kit / steel因子 / SV40ラージT抗原
Research Abstract	卵または精子に分化し得る始原生殖細胞株を得る目的で、いくつかの近交系マウス(C57B1/6、Balb/c、DBA/2、C3H/He、129Sv)の8.5日胚から得た始原生殖細胞の初代及び継代培養を試みた。膜結合型Sl因子、LIFおよびbFGF存在下に培養するといずれの系統からも胚盤胞由来の胚幹細胞(ES細胞)とコロニーの形態がよく似た細胞株(EG細胞)が得られた。これらは始原生殖細胞および未分化胚幹細胞のマーカーであるアルカリ性フォスファターゼと4C9抗原を発現していることがわかった。またDBA/2からは、ES細胞のように細胞が凝集したコロニーを作る細胞株に加えて、初代培養した始原生殖細胞に似た、細胞がバースト状に広がったコロニーをつくる細胞株も得られた。特にこの細胞株は始原生殖細胞の性質を保っている可能性があるので、今後その卵または精子への分化能を、生殖巣へ移植することにより調べる予定である。また生体内や培養条件下で起こる始原生殖細胞の増殖停止が、c-Kitの発現低下と関係している可能性があるので、c-Kitを恒常的に発現するトランスジェニックマウスから始原生殖細胞株を得ることを試みている。培養条件下で膜結合型Sl因子に加えてLIF、bFGFが存在すると多くの場合、ES細胞に似た細胞株が得られる。これに対してc-Kitの恒常的発現によりSl因子にのみ依存して増え続け、始原生殖細胞の性質を保った細胞株が得られることが期待される。そのためにこれまでに、生殖細胞特異的に発現するoct-3遺伝子のプロモーターにc-kitのcDNAをつないだキメラ遺伝子を作り、これを受精卵に導入してトランスジェニックマウスを得た。今後このマウスを交配して得られる胚を材料に始原生殖細胞の培養と株化を試みる予定である。

Research Products

(13 results)

All Other

All Publications (13 results)

[Publications] Pierce,D.F.: "Inhibition of mammary duct development but not alveolar outgrowth during pregnancy in MMTV-TGFβ^<S223/225> transgenic mice" Genes & Development. 7. 2308-2317 (1993)
[Publications] Coffey,R.J.: "Acceleration of mammary neoplasia in virgin mouse mammary tumor virus enhancer/promotor-transforming growth factor α transgenic mice by 7,12 dimethy benzanthracere" Cancer Research. (1994)
[Publications] Yanai,N.: "Apoptosis induced at nonpermisive temperature by a transient increase in p53 in cell lines immortalized with ts SV40 T-antigen gene" Experimental Cell Research. 211. (1994)
[Publications] Yanai,N.: "Role for integrin VLA-4 in stroma dependent erythnpoiesis" Blood. 83. (1994)
[Publications] 松居靖久: "始原生殖細胞由来の細胞株の胚幹細胞としての性質" 日本疾患モデル学会記録. 9. 9-14 (1993)
[Publications] 松居靖久: "始原生殖細胞株の樹立とその性質" Tissue Culture Research Communications. 12. 273-278 (1993)
[Publications] 松居靖久: "生殖細胞の癌,テラトーマの発生機構" 実験医学. 11. 713-716 (1993)
[Publications] 松居靖久: "マウス始原生殖細胞の培養" 組織培養. 19. 176-180 (1993)
[Publications] 松居靖久: "Sl因子による始原生殖細胞の増殖制御機構" Medical Immunology. 26. 81-88 (1993)
[Publications] 松居靖久: "c-KitとSl因子の発生過程における発現と機能" 実験医学. 11. 1686-1691 (1993)
[Publications] 松居靖久: "c-Kitによる細胞内情報伝達" 生化学. 65. 1317-1321 (1993)
[Publications] 松居靖久: "マウス始原生殖細胞の体外培養" 実験医学. 12. 123-130 (1994)
[Publications] 松居靖久: "生殖細胞の生成と増殖,分化" 細胞工学. (1994)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

始原生殖細胞機能保持細胞株の樹立と発生工学への応用

Principal Investigator

松居 靖久 東北大学, 加齢医学研究所, 助手 (40241575)

Research Products

[Publications] Pierce,D.F.: "Inhibition of mammary duct development but not alveolar outgrowth during pregnancy in MMTV-TGFβ^<S223/225> transgenic mice" Genes & Development. 7. 2308-2317 (1993)

[Publications] Coffey,R.J.: "Acceleration of mammary neoplasia in virgin mouse mammary tumor virus enhancer/promotor-transforming growth factor α transgenic mice by 7,12 dimethy benzanthracere" Cancer Research. (1994)

[Publications] Yanai,N.: "Apoptosis induced at nonpermisive temperature by a transient increase in p53 in cell lines immortalized with ts SV40 T-antigen gene" Experimental Cell Research. 211. (1994)

[Publications] Yanai,N.: "Role for integrin VLA-4 in stroma dependent erythnpoiesis" Blood. 83. (1994)

[Publications] 松居靖久: "始原生殖細胞由来の細胞株の胚幹細胞としての性質" 日本疾患モデル学会記録. 9. 9-14 (1993)

[Publications] 松居靖久: "始原生殖細胞株の樹立とその性質" Tissue Culture Research Communications. 12. 273-278 (1993)

[Publications] 松居靖久: "生殖細胞の癌,テラトーマの発生機構" 実験医学. 11. 713-716 (1993)

[Publications] 松居靖久: "マウス始原生殖細胞の培養" 組織培養. 19. 176-180 (1993)

[Publications] 松居靖久: "Sl因子による始原生殖細胞の増殖制御機構" Medical Immunology. 26. 81-88 (1993)

[Publications] 松居靖久: "c-KitとSl因子の発生過程における発現と機能" 実験医学. 11. 1686-1691 (1993)

[Publications] 松居靖久: "c-Kitによる細胞内情報伝達" 生化学. 65. 1317-1321 (1993)

[Publications] 松居靖久: "マウス始原生殖細胞の体外培養" 実験医学. 12. 123-130 (1994)

[Publications] 松居靖久: "生殖細胞の生成と増殖,分化" 細胞工学. (1994)

松居靖久東北大学, 加齢医学研究所, 助手 (40241575)