1993 Fiscal Year Annual Research Report

未分化胚細胞と器官原基の培養法を用いた哺乳類形態形成に関する動物実験代替法の開発

Research Project

Project/Area Number	05557002
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	塩田浩平京都大学, 医学部, 教授 (80109529)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	土屋利江国立衛生試験所, 部長石橋誠京都大学, 医学部, 助手 (30232341) 山本雅子麻布大学, 獣医学部, 助教授 (50130901) 有嶋和義麻布大学, 獣医学部, 助教授 (10124265) 森千里京都大学, 医学部, 助教授 (90174375)
Keywords	胚細胞 / 器官原基 / 器官培養 / 形態形成 / 発生毒性 / マウス胎児 / ヒト胎児 / 動物実験代替
Research Abstract	1.胎児器官培養法の確立申請者らが開発したマウス胎児の口蓋と四肢原基の器官培養法について、至適培養条件(培養液、気相、回転数など)を検討し、それを確立した。また、5-fluorouracilとhydroxyureaをモデル物質として用い、胎齢12日と13日のマウス胎児口蓋に対する毒性を調べたところ、13日に比べて12日胎児の口蓋の方が有意に感受性が高く、発生毒性スクリーニングには胎齢12日のマウス胎児を用いるのが適当であると考えられた。更に、in vivo試験で繁用されるラットについても胎児器官の培養法を検討し、胎齢13〜14日のラット胎児器官をマウスに準じて培養する方法をほぼ確立した。 2.発生毒性スクリーニングのためのvalidation study マウス胎児口蓋培養系の発生毒性スクリーニング系としての有用性を検討するため、約15種類の化学物質を選び、in vitroでの種々の濃度における毒性を調べた。その結果、器官培養系における毒性の強さは、in vivoでの発生毒性の有無やその強さとよく相関しており、また全胚培養法での毒性に近い毒性が示された。この結果から、マウス胎児器官培養系の発生毒性スクリーニング系としての有用性が確認された。 3.四肢奇形発生メカニズムの解析マウス胎児胚芽を培養し、in vivoで多指を誘発するbromodeoxyuridine(BrdU)を培地に添加したところ、指間部の細胞死が有意に減少した。このことからBrdUは指間のプログラム細胞死を抑制することによって指奇形を起こすことがわかった。胎児器官培養法は各種奇形の形成メカニズムの解明に有用と考えられる。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Ukita,K.,Fukui,Y.,Shiota,K.: "Effects of penatal alcohol exposure in mice" Reproductive Toxicology. 7. 273-281 (1993)
[Publications] Ukita,K.,Arishima,K.,Yamamoto,M.,Shiota,K.: "Lack of constrictive effects of cocaine on the fetal ductus arteriosus in the rat" Congenital Anomalies. 33. 143-146 (1993)
[Publications] Mino,Y.,Mizusawa,E.,Shiota,K.: "Effects of anticonvulsant drugs on fetal mouse palates cultured in vitro" Reproductive toxicology. (印刷中). (1994)
[Publications] Mori,C.,Nakamura,N.,Okamoto,Y.,Shiota,K.: "Cytochemical identification of programmed cell death in the fusing fetal mouse palate by specifice labeling of DNA fragmenatior" Anatomy and Embryology. (印刷中). (1994)
[Publications] Takizawa,T.,Arishima,K.,Yamamoto,M.,Shiota,K.: "Inhibitory effect of enalapril on the constriction of the ductus arteriosus in the rat" Journal of Veterinary Science. (印刷中). (1994)
[Publications] 塩田浩平: "発生毒性試験におけるin vitro試験法とその意義について" 関西実験動物学会雑誌. (印刷中). (1994)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

未分化胚細胞と器官原基の培養法を用いた哺乳類形態形成に関する動物実験代替法の開発

Principal Investigator

塩田 浩平 京都大学, 医学部, 教授 (80109529)

Research Products

[Publications] Ukita,K.,Fukui,Y.,Shiota,K.: "Effects of penatal alcohol exposure in mice" Reproductive Toxicology. 7. 273-281 (1993)

[Publications] Ukita,K.,Arishima,K.,Yamamoto,M.,Shiota,K.: "Lack of constrictive effects of cocaine on the fetal ductus arteriosus in the rat" Congenital Anomalies. 33. 143-146 (1993)

[Publications] Mino,Y.,Mizusawa,E.,Shiota,K.: "Effects of anticonvulsant drugs on fetal mouse palates cultured in vitro" Reproductive toxicology. (印刷中). (1994)

[Publications] Mori,C.,Nakamura,N.,Okamoto,Y.,Shiota,K.: "Cytochemical identification of programmed cell death in the fusing fetal mouse palate by specifice labeling of DNA fragmenatior" Anatomy and Embryology. (印刷中). (1994)

[Publications] Takizawa,T.,Arishima,K.,Yamamoto,M.,Shiota,K.: "Inhibitory effect of enalapril on the constriction of the ductus arteriosus in the rat" Journal of Veterinary Science. (印刷中). (1994)

[Publications] 塩田 浩平: "発生毒性試験におけるin vitro試験法とその意義について" 関西実験動物学会雑誌. (印刷中). (1994)

塩田浩平京都大学, 医学部, 教授 (80109529)

[Publications] 塩田浩平: "発生毒性試験におけるin vitro試験法とその意義について" 関西実験動物学会雑誌. (印刷中). (1994)