1993 Fiscal Year Annual Research Report

破骨細胞の形成と骨吸収活性を指標とした各種薬物の簡便なスクリーニング系の確立

Research Project

Project/Area Number	05557082
Research Institution	Showa University
Principal Investigator	須田立雄昭和大学, 歯学部, 教授 (90014034)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	佐々木崇寿昭和大学, 歯学部, 助教授 (50129839) 山口朗昭和大学, 歯学部, 助教授 (00142430) 宇田川信之昭和大学, 歯学部, 助手 (70245801) 高橋直之昭和大学, 歯学部, 助教授 (90119222)
Keywords	破骨細胞 / 破骨細胞前駆細胞 / カルシトニン / bisphosphonates / ポドソーム形成 / 吸収窩
Research Abstract	【.encircled1.】破骨細胞前駆細胞の同定と分化過程の解析骨芽細胞と骨髄細胞の共存培養系を用い、破骨細胞に分化する前駆細胞の形質を検索した。破骨細胞に分化を開始する細胞はマクロファージの形質を発現した単核の細胞で、分化の過程でマクロファージの形質が消失することが示された。【.encircled2.】単離破骨細胞を用いた簡便な骨吸収活性の定量骨芽細胞と骨髄細胞の共存培養をコラーゲンゲル上で行ない、更にコラゲナーゼで消化することより、骨吸収能を有した破骨細胞を大量に調製することに成功した。この破骨細胞を象牙質切片上で培養し、形成された吸収窩を画像解析装置にて計測するという、きわめて簡便な骨吸収能測定法を確立した。【.encircled3.】ポドソーム形成と骨吸収破骨細胞は骨吸収を開始するにあたり、明帯(clear zone)に相当するF-actinのドット様の構造体よりなるポドソームを形成する。このポドソームの形成は、tyrosine kinaseの阻害剤であるherbimycin Aや、Phosphatidylinositol 3-kinaseの阻害剤であるwortmanninにより阻害された。また、これらの阻害剤は破骨細胞の吸収窩形成も同様に抑制した。一方、カルシトニンもcAMPを介して破骨細胞の吸収窩形成とポドソームの形成を強く抑制した。このように、ポドソーム形成を指標に骨吸収調節薬のスクリーニングが可能になった。【.encircled4.】bisphosphonatesの骨吸収抑制作用の解析破骨細胞形成系と吸収窩形成系を用い、bisphosphonatesの作用機序を検索した。bisphosphonatesは破骨細胞の分化過程は抑制せず、破骨細胞の機能を抑制することが示された。また、bisphosphonatesはポドソームを形成した破骨細胞に特異的に作用することが示された。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Tanaka,S.et al.: "Macrophage colony-stimulating factor is indispensable both proliferation of osteoclast progenitors." J.Clin.Invest.91. 257-263 (1993)
[Publications] Sato,T.et al.: "The biological roles of the thirs component of complement in osteoclast formation." Endocrinology. 133. 397-404 (1993)
[Publications] Tamura,T.et al.: "A new resorption assay with mouse osteoclast-like multinucleated cells formed in vitro." J.Bone Miner.Res.8. 953-960 (1993)
[Publications] Tamura,T.et al.: "Soluble interleukin-6 receptor tirggers osteoclast formation by interleukin 6." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 90. 11924-11928 (1993)
[Publications] Takahashi,N.et al.: "Postmitotic osteoclast precursors are mononuclear cells which express macrophage-associated phenotypes." Dev.Biol.,. (in press.). (1994)
[Publications] Nishimura,A.et al.: "Regulation of messenger ribonucleic acid expression of 1alpha,25-dihydroxyvitamin D_3-24-hydroxylase in rat osteoblasts." Endocrinology,. (in press.). (1994)
[Publications] 須田,立雄: "マクロファージ実験マニュアル:破骨細胞の形成と骨吸収" 講談社, 60-71 (1992)
[Publications] Suda,T.et al.: "The cell biology of bone,joints,and skin," Principal Medical Biology,(in press), (1994)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

破骨細胞の形成と骨吸収活性を指標とした各種薬物の簡便なスクリーニング系の確立

Principal Investigator

須田 立雄 昭和大学, 歯学部, 教授 (90014034)

Research Products

[Publications] Tanaka,S.et al.: "Macrophage colony-stimulating factor is indispensable both proliferation of osteoclast progenitors." J.Clin.Invest.91. 257-263 (1993)

[Publications] Sato,T.et al.: "The biological roles of the thirs component of complement in osteoclast formation." Endocrinology. 133. 397-404 (1993)

[Publications] Tamura,T.et al.: "A new resorption assay with mouse osteoclast-like multinucleated cells formed in vitro." J.Bone Miner.Res.8. 953-960 (1993)

[Publications] Tamura,T.et al.: "Soluble interleukin-6 receptor tirggers osteoclast formation by interleukin 6." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 90. 11924-11928 (1993)

[Publications] Takahashi,N.et al.: "Postmitotic osteoclast precursors are mononuclear cells which express macrophage-associated phenotypes." Dev.Biol.,. (in press.). (1994)

[Publications] Nishimura,A.et al.: "Regulation of messenger ribonucleic acid expression of 1alpha,25-dihydroxyvitamin D_3-24-hydroxylase in rat osteoblasts." Endocrinology,. (in press.). (1994)

[Publications] 須田,立雄: "マクロファージ実験マニュアル:破骨細胞の形成と骨吸収" 講談社, 60-71 (1992)

[Publications] Suda,T.et al.: "The cell biology of bone,joints,and skin," Principal Medical Biology,(in press), (1994)

須田立雄昭和大学, 歯学部, 教授 (90014034)