1994 Fiscal Year Annual Research Report
クローン化Kチャンネルの抗不整脈薬開発への応用の研究
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05557116
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
平 則夫 東北大学, 医学部, 教授 (60004553)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
石井 邦明 東北大学, 医学部, 助手 (10184459)
布木 和夫 東北大学, 医学部, 講師 (10172743)
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| Keywords | 抗不整脈薬 / Kチャンネルクローン / 遅延整流型電流 / 一過性外向き電流 / 内向き整流性電流 |
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| Research Abstract |
1.内向き整流Kチャンネル
ウサギの心筋よりクローニングした内向き整流特性を示すKチャンネル(RBHIK1)に対する各種抗不整脈薬(第4群のverapamilや心筋のI_<K1>を特異的に抑制すると言われているRP62719等)の影響を卵母細胞の発現系を用いて検討したが、検討した薬剤の中にはRBHIK1の電流を抑制するものはなかった。しかし、RBHIK1のmRNAはウサギの心室筋に非常に豊富に存在しており生体内でも重要な役割を演じていると考えられるため、更に詳細な検討が必要である。その意味で、現在パッチクランプ法を用いた単一電流の解析やヒトの培養細胞へのトランスフェクション等を行っている。
2.電位依存性Kチャンネル
(1)昨年度より研究を続けているラット心筋のKチャンネルクローン(遅延整流型のKv1.2と一過性外向き型のKv1.4)に対する各種抗不整脈薬(第1群のdisopyramide、flecainide、第3群のclofilium、bertosamil、第4群のverapamil)の影響を検討し、disopyramideは両K電流を抑制しないが、その他の薬剤は濃度依存的に両K電流を抑制すること、そしてその抑制の時間依存性等において薬剤間で違いが認められることを明らかにした。しかし、両K電流を抑制するためにはネイテイブな電流の場合と比較して大変高用量の薬剤が必要であった。今後その原因に関する検討が必要である。
(2)電気生理学的研究により多く用いられているウサギの心筋からShakerファミリーに属するKチャンネルをクローニングしその一次構造を決定した。それはKv1.5でありラットのKv1.5とアミノ酸レベルで85%の相同性を有していた。このKチャンネルに関する詳細な電気生理学的検討は現在行っている。
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[Publications] T.Yamagishi,et.al.: "Antiarrhythmic and bradycardic drugs inhibit currents of cloned K^+ channels,Kv1.2 and Kv1.4" Eur.J.Pharmacol.(in press).
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[Publications] T.Yamagishi,et.al.: "The effects of antiarrhythmic and bradycardic drugs on cloned cardiac K^+ channels" Heart and Vessels. (in press).
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[Publications] K.Ishi,et.al.: "The amino acid residues responsible for sensitivity to pH of cloned K^+ channel" Heart and Vessels. (in perss).
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[Publications] H.Okada,et.al.: "Cloning of a swelling-induced chloride current releted protein from rabbit heart" Biochim.Biophys.Acta. (in perss).
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[Publications] K.Nunoki,et.al.: "Hybrid potassium channels by tandem linkage of inactivating and non-inactivating subunits" J.Biol.Chem.269. 24138-24142 (1994)
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[Publications] H.Murakoshi,et.al.: "Receptor-mediated modulation of rat Kv1.2 in Xenopus oocytes" Eur.J.Pharmacol.mol.Pharmacol.Sec.268. 451-454 (1994)
