1993 Fiscal Year Annual Research Report

生体高分子用レーザー増感NMR装置の製作

Research Project

Project/Area Number	05558088
Research Institution	Yokohama City University
Principal Investigator	西村善文横浜市立大学, 大学院総合理学研究科, 教授 (70107390)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	池田壮日本分光(株), 第1事業部, 副技師長黒田幸夫日本ブルカー(株), 技術サービス部, 部長片平正人横浜国立大学, 工学部, 講師 (70211844)
Keywords	NMR / レーザー / 生体高分子 / 蛋白質 / CIDNA / DNA / レーザー増感NMR / 偏光
Research Abstract	本年度は生体高分子用レーザー増感NMR装置の製作に当たって、まず光照射用プローブの設計と製作を行った。さらに光照射用プローブのNMR測定でのチェックを行った。次にレーザーの導入について検討した。特にレーザーの偏光を高速に切り換えるために2光路に分けたあと偏光した光をマイクロスイッチで制御する方法を考えた。以上の検討をおこなって少なくとも通常の光CIDNPの測定を検討した。リゾチームの試料を使って光CIDNPの測定を行なった。またレーザー増感NMRの測定を行うための試料調製を行い、6種類の蛋白質でNMRの測定を行った。それは、核内がん原遺伝子産物のMybのNMR結合ドメイン、同じく核内がん原遺伝子産物EtsのDNA結合モチーフのペプチド、浸透圧応答転写調節因子OmpRのDNA結合ドメイン、リン酸レギュロン転写調節因子PhoBのDNA結合ドメイン、プリンリプレッサーのDNA結合ドメイン、CRE-BPIのEIAとの相互作用ドメインである。以上の内MybのDNA結合ドメインやプリンリプレッサーのDNA結合ドメインに関しては構造解析を行いレーザー増感NMRで測定を行うための準備が整った。レーザー増感NMRの測定を行うためのレーザーの調製を行った。現有設備のレーザーは光強度として問題なく使用できることをレーザー分光(ラマン分光)の測定により確認した。実際にレーザー分光で測定した試料はヘム蛋白質などである。これらの成果を基に次年度はいくつかの試料について実際にレーザー増感NMRの測定を行う予定である。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] 谷川潤: "Recognition of specific DNA sequences by the c-myb protooncogene product:Role of three repeat units in the DNA-binding domain" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 90. 9320-9324 (1993)
[Publications] 皿井明倫: "Thermal Stability of the DNA-binding domain of the Myb oncoprotain" Biochemstry. 32. 7759-7764 (1993)
[Publications] 緒方一博: "Solution structures of Myb DNA-binding domain and its complex with DNA" Nuclecic Acids Symp.Ser.29. 201-202 (1993)
[Publications] 鍔木基成: "Cytochrome d axial ligand of the,bd-type terminal quinol exidase from Escherichia coli" FEBS. 335. 13-17 (1993)
[Publications] 片平正人: "A Raman spectroscopic study on conformations of DNA origomers:A dominant effect of an AA:TT sequence over those of AT:AT and TA:TA sequences on determining conformations of DNA duplexes" Nucleosided and Nucleotides. 印刷中. (1994)
[Publications] 片平正人: "NMR studies of G:A mismatches in oligodeoxyribonucleotide duplexes modeled after ribozymes" Nucleic Acids Res.21. 5418-5424 (1993)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

生体高分子用レーザー増感NMR装置の製作

Principal Investigator

西村 善文 横浜市立大学, 大学院総合理学研究科, 教授 (70107390)

Research Products

[Publications] 谷川潤: "Recognition of specific DNA sequences by the c-myb protooncogene product:Role of three repeat units in the DNA-binding domain" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 90. 9320-9324 (1993)

[Publications] 皿井明倫: "Thermal Stability of the DNA-binding domain of the Myb oncoprotain" Biochemstry. 32. 7759-7764 (1993)

[Publications] 緒方一博: "Solution structures of Myb DNA-binding domain and its complex with DNA" Nuclecic Acids Symp.Ser.29. 201-202 (1993)

[Publications] 鍔木基成: "Cytochrome d axial ligand of the,bd-type terminal quinol exidase from Escherichia coli" FEBS. 335. 13-17 (1993)

[Publications] 片平正人: "A Raman spectroscopic study on conformations of DNA origomers:A dominant effect of an AA:TT sequence over those of AT:AT and TA:TA sequences on determining conformations of DNA duplexes" Nucleosided and Nucleotides. 印刷中. (1994)

[Publications] 片平正人: "NMR studies of G:A mismatches in oligodeoxyribonucleotide duplexes modeled after ribozymes" Nucleic Acids Res.21. 5418-5424 (1993)

西村善文横浜市立大学, 大学院総合理学研究科, 教授 (70107390)