1994 Fiscal Year Annual Research Report

フォトクロミック分子を抗原とする免疫応答の光制御技術の開発

Research Project

Project/Area Number	05558089
Research Institution	Nagoya City University
Principal Investigator	中西守名古屋市立大学, 薬学部, 教授 (90090472)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	石森義雄東芝, 材料デバイス研究所, 研究員鳥越知香子名古屋市立大学, 薬学部, 講師 (70237163) 鈴木和男国立予防衛生研究所, 生物活性, 室長 (20192130) 水口純一郎東京医科大学, 医学部, 教授 (20150188)
Keywords	フォトクロミック抗原 / 抗原抗体反応 / 光制御 / T細胞 / 免疫応答 / 抗原提示細胞 / シス・トランス異性化反応 / カルシウムイオン
Research Abstract	抗体やT細胞レセプターの多様性の特徴を生かすと、光で形を変える分子(フォトクロミック分子)を抗原とする免疫応答がシステム確立できると考えられる。また、それらの免疫応答システムは光制御が可能である。そこで、1)フォトクロミック分子(アゾベンゼン誘導体)に対するモノクローン抗体の調製を試み、アゾベンゼンを抗原(Glu-azoAla-Gly-Gly,azoAla=L-p-phenylazophenylalanine)とする数種類のモノクローン抗体の作製に成功した。次に、2)それらのモノクローン抗体を用いて、抗原抗体反応の追求とその光制御を行った。その結果、紫外光(360nm)と可視光(430nm)の照射により、抗体はアゾベンゼンペプチドのトランス型に結合し、シス型になると解離することが明らかになった。また、3)パルスレーザ光を用いて、抗原抗体反応の光制御のメカニズムを追求した。その結果、抗体の抗原結合部位の中で、抗原の光異性化反応が起こっていることが明らかになった。また、4)シス・トランスの異性化反応は数十ピコ秒以内に起こっていた。5)次に、アゾベンゼンを抗原とするヘルパーT細胞の調製に取り掛かり、アゾベンゼン誘導体を抗原とする、T細胞ハイブリドーマ株の樹立に成功した。6)それらのT細胞ハイブリドーマを用いて、T-B細胞間相互作用を画像処理法により追求した。その結果、T細胞ハリブリド-マは抗原提示細胞とフォトクロミック抗原の存在下で活性化され、細胞内カルシウムイオン濃度の上昇した。7)また、T細胞ハイブリドーマは抗原提示細胞との相互作用によりアポトーシスが誘導されることが明らかになった。そして、T細胞のアポトーシスを光制御できることを明らかにした。8)これらの成果を集約し、フォトクロミック分子による免疫応答の光制御技術を確立した。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] C.Torigoe: "Single cell observation of calcium signals in Tvcelvs and antigen presenting cells during antigen presentation" Immunology Lett.(in press). (1995)
[Publications] H.Katayama: "Triggering of calcium signals in antigen-specific Bvcells on the supported lipid monolayers" Biochim.Biophys,Acta. (in press). (1995)
[Publications] Y.Okamoto: "Confocal fluoresceuce microscopy forstuding thapsigargin-induced bivalent-cation entry into B cells" Biochem,J.350. 1011-1015 (1995)
[Publications] M.Harada: "Photocontrolled uptake and release of photochromic haptens by monoclonal antibodies" Bull.Chem.Soc.Jpn.67. 1380-1385 (1994)
[Publications] E.Kato: "Interaction between ganglioside-containing liposome and rat T-lymphocyet:Confocal fluorescence microscopic study" Biochem,Biophys,Res,Commun.203. 1750-1755 (1994)
[Publications] 中西守: "免疫系蛋白質" 蛋白質・核酸・酵素. 39. 1176-1183 (1994)
[Publications] 中西守: "膜学実験シリーズ・生態膜編" 共立出版, 424 (1994)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

フォトクロミック分子を抗原とする免疫応答の光制御技術の開発

Principal Investigator

中西 守 名古屋市立大学, 薬学部, 教授 (90090472)

Research Products

[Publications] C.Torigoe: "Single cell observation of calcium signals in Tvcelvs and antigen presenting cells during antigen presentation" Immunology Lett.(in press). (1995)

[Publications] H.Katayama: "Triggering of calcium signals in antigen-specific Bvcells on the supported lipid monolayers" Biochim.Biophys,Acta. (in press). (1995)

[Publications] Y.Okamoto: "Confocal fluoresceuce microscopy forstuding thapsigargin-induced bivalent-cation entry into B cells" Biochem,J.350. 1011-1015 (1995)

[Publications] M.Harada: "Photocontrolled uptake and release of photochromic haptens by monoclonal antibodies" Bull.Chem.Soc.Jpn.67. 1380-1385 (1994)

[Publications] E.Kato: "Interaction between ganglioside-containing liposome and rat T-lymphocyet:Confocal fluorescence microscopic study" Biochem,Biophys,Res,Commun.203. 1750-1755 (1994)

[Publications] 中西 守: "免疫系蛋白質" 蛋白質・核酸・酵素. 39. 1176-1183 (1994)

[Publications] 中西 守: "膜学実験シリーズ・生態膜編" 共立出版, 424 (1994)

中西守名古屋市立大学, 薬学部, 教授 (90090472)

[Publications] 中西守: "免疫系蛋白質" 蛋白質・核酸・酵素. 39. 1176-1183 (1994)

[Publications] 中西守: "膜学実験シリーズ・生態膜編" 共立出版, 424 (1994)