1994 Fiscal Year Annual Research Report
組織切片に含まれる細胞間マトリックスとそのmRNAの精密な定量法の開発
Project/Area Number |
05660344
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Research Institution | KYOTO UNIVERSITY |
Principal Investigator |
眞鍋 昇 京都大学, 農学部, 助教授 (80243070)
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Keywords | 細胞間マトリックス / 免疫組織化学的微量定量法 / 疾患モデル動物 / 慢性ウイルス性肝炎 / 肝線維症 / 糸球体腎炎 / 骨格筋線維 / イソミオシン |
Research Abstract |
実験的に作成した病態動物、ウイルス感染患者、健常な哺乳動物(家畜や実験動物)などから肝臓、腎臓、骨格筋などの組織を摘出し、液体窒素あるいはドライアイス・イソペンタン中にて急速凍結した後、クリオスタットを用いて未固定組織切片とし、この凍結組織切片に存在する細胞間マトリックス(ECM;I型コラーゲンなど)、速収縮ミオシン、それらのmRNAなどの生理科学的に重要な物質を検出・定量できる免疫組織化学的微量定量法を創出し、その有用性を確認した。 従来からある生化学的定量法として比較して、(1)検出しようとしている物質の組織内での局在を保ちつ定量できる点、(2)原理的に免疫化学法を応用しているので1000倍のオーダーで高感度に検出できるので標本量が極微量ですむ点で優れている。 病理学的場面では、組織細胞の形態をよく保存しながら様々な生理活性物質の精密な定量ができる本法を活用することで、正確な診断と予後予測が可能となる。また、高感度であるので、家畜や患者からバイオプシー標本のように極少量のサンプルを採取することで様々な生理活性物質の定量解析が可能であり、獣医畜産や臨床病理場面での様々な応用展開が期待できる。
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[Publications] Manabe N.et al.: "Immunohistochemical microquantification of fast-myosin in frozen histological sections of mammalian skeletal muscles." Journal of Animal Science. 73. 88-95 (1995)
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[Publications] Manabe N.et al.: "A new immunohistochemical method for quantification of fast-myosin in frozen histologic section of the rat skeletal muscles" Journal of Veterinary Medical Science. 56. 7-13 (1994)
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[Publications] Manabe N.et al.: "Immunohistochemical microquantitation method for type I collagen in kidney histologic section of the rats." Journal of Veterinary Medical Science. 56. 147-150 (1994)
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[Publications] Manabe N.et al.: "Phosphorus-31 nuclear magnetic resonance study of energy metabolism in intact slow- and fast-twitch muscles of rats." Journal of Animal Science. 72. 103-108 (1994)
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[Publications] Manabe N.et al.: "Interferon-α2b therapy reduces liver fibrosis in chronic non-A,non-B hepatitis:A quantitative Histological evaluation." Hepatology. 18. 1344-1349 (1993)
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[Publications] Manabe N.et al: "Slow-twitch myofiber are observed in masseter muscle of the hypothalamic obese rat." Animal Science and Technology. 64. 440-447 (1993)
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[Publications] Manabe N.et al.: "Immunohistochemical quantitation of extracellular matrices in the kidney cortex of rats with experimental nephropathy" International union of physiological sciences (Oxford University Press,London,U.K.), 253 (1993)