1994 Fiscal Year Annual Research Report
哺乳類の精子形成過程に特異的に発現する解糖系酵素遺伝子に関する分子生物学的研究
Project/Area Number |
05670008
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Research Institution | KYOTO UNIVERSITY |
Principal Investigator |
森 千里 京都大学, 医学部, 助教授 (90174375)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
石橋 誠 京都大学, 医学部, 助手 (30232341)
塩田 浩平 京都大学, 医学部, 教授 (80109529)
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Keywords | 哺乳類 / 精子形成 / 解糖系酵素 / 分子生物学 / ヘキソキナーゼ / グリカロアルデヒド3リン酸デヒドロゲナーゼ |
Research Abstract |
研究代表者らがマウスでクローニングした精子形成過程に特異的に発現する解糖系酵素遺伝子{spermatogenic cell specific glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase(Gapd-s)及びhexokinase(Hk-s)に関して、平成5年度に両遺伝子の種特異性を検討した結果、ヒトにおいても相同遺伝子が存在することが示唆された。よって、平成6年度はヒト精巣cDNA libary より各々の解糖系酵素の精子形成過程特異的タイプのcDNAのクローニングを開始し、ヒトにおけるGapd-s及びHk-s両遺伝子のcDNA塩基配列及びアミノ酸配列を決定した。(現在、論文投稿準備中) さらに、マウスとヒトのGapd-s及びHk-s両遺伝子に対する特異的プローブを様々な哺乳類の精巣から抽出したtotal RNAとハイブリダイズした結果、Gapd-s及びHk-s両遺伝子は解糖系酵素の進化的面からも非常に重要であり、哺乳類全般に保存されていることが判明した。また、両遺伝子の産物は解糖系酵素としての機能の他に精子の形態形成蛋白としての役割を持つことが判明した。次に、マウスのGapd-s及びHk-s両遺伝子のcDNA塩基配列から類推したアミノ酸配列を基に合成ペプチドを合成後ポリクロナール抗体を作製した。現在、ポリクロナール抗体の特異性を検定しおり、免疫組織化学による精巣及精子における両遺伝子産物の局在を検討中である。
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[Publications] Chisato Mori etal: "Uuique Hexo kiuas mRNA lacking the poin-Birding Dormain are developmentolly expressed in mousl spermatogenic to geric cells" Biology of Reproduction. 49. 191-203 (1993)
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[Publications] 森 千里: "精子形成過程において特異的に発現する解糖系酵素 glyceraldehyde 3-phosphate delydrogenase(Gapd-3)について" 解剖学雑誌. 68. 482 (1993)
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[Publications] 森 千里: "精子形成過程に特異的な発現をする遺伝子(hexokirase(HKl-S),glyceraldihyde 3-phosphate delydrogenase(Gapd-3)〕について" 解剖学雑誌. 68. 759 (1993)
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[Publications] J.E.Welch.C.Mori etal.: "The Spermatogcnic cell-Specific glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase mPNA is expressed,in human testis" Molecular Biology of the Cell. 4. 30a (1993)
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[Publications] K.D.Fulcher,C.Mori etal.: "Characterization of Fscl cDNA for a Mousesperm Fibnous Sheath Component" Biology of Reproduction. 52. 41-49 (1995)