1993 Fiscal Year Annual Research Report

培養副腎髄質細胞における転写調節因子の変動とNaチャンネル発現の制御

Research Project

Project/Area Number	05670099
Research Institution	宮崎医科大学
Principal Investigator	和田明彦宮崎医科大学, 医学部, 教授 (30131949)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山本隆一宮崎医科大学, 医学部, 助手 (10094111) 占部正信宮崎医科大学, 医学部, 助手 (00094087)
Keywords	Na channels / Expression / A Kinase / C Kinase / ^3H-saxitoxin / ^<22>Na influx / Veratridine / Brevetoxin
Research Abstract	Naチャネルのdensityは、ニューロンの各部位において、それぞれけ個有の範囲に保たれており、そのことが細胞興奮性を精緻に調節し、ひいては、細胞機能(神経伝達物質の合成、分泌など)を大きく修飾している。遺伝子転写に関与するtrans-elementsが、リン酸化を受けることにより活性化されることが知られている。そこで、今回、私達は、培養ウシ副腎髄質細胞Naチャネルの発現を変動させる細胞内メッセンジャー、蛋白質リン酸化酵素を検討した。 1.Aカイネースの関与 a)細胞内環状AMP濃度を上昇させる因子(環状AMP、フォスフォジエステラーゼ阻害剤、フォルスコリン)の慢性(10数時間)投与は、Naチャネルへの^3H-サキシトキシン結合のBmaxを増加させた(Kdは不変)。これらの作用は、Aカイネース阻害剤投与により阻止された。 b)投与阻害薬アクチノマイシンD、翻訳阻害薬サイクロヘキサマイド、蛋白グリコシレーション阻害薬テュニカマイシンの存在下では上記の^3H-サキシトキシン結合量増加は認められなかった。 c)ヴェラトリジン、ブレベトキシンによる細胞内への^<22>Na流入のアロステリック調節機構は、処理細胞においても保持されていた。ヴェラトリジン、ブレベトキシンのEC_<50>は不変であったが、^<22>Na流入量は増大した。 Cカイネースの関与 a)プロテイン・カイネースC(PKC)賦活薬処理細胞では、10数時間の潜時ののち、^3H-サキシトキシン結合のBmaxが減少した(Kd不変)。PKC活性化作用をもたないアナログは、効果がなかった。これらの作用は、Cカイネース阻害薬により阻止された。 b)PKC賦活薬の作用は、PKCのdown-regulation(^3H-PDBu結合で測定)ののちに進行した。^3H-PDBu結合、および、^3H-サキシトキシン結合のdown-regulationは可逆的であった。 c)Naチャネル崩壊率は、PKC賦活薬処理群と対照細胞との間では差を認めなかった。ヴェラトリジン、ブレベトキシンのEC_<50>は不変であったが、^<22>Na流入量は減少した。以上、Aカイネース、Cカイネースによりリン酸化された転写調節蛋白が、Naチャネル遺伝子の発現を促進、抑制していることが示唆された。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] A.Wada,Y.Uezono,F.Izumi: "Down-regulation of voltage-dependent sodium channel and protein kinase C in cultured bovine adrenal medullary cells." Japanese Journal of Pharmacology. 61(Sup.I). 254 (1993)
[Publications] T.Yuhi,A.Wade et al.: "Characterization of〔^3H〕brevetoxin binding to voltage-dependent sodium channels in adrenal medullary cells." Naunyn-Schmiedeberg′s Archives of Pharmacology. in press. (1994)
[Publications] T.Yuhi,T.Yanagita et al.: "cAMP mediater expression of voltage-dependent Na channel in cultured bovine adrenal medullary cells." Japanese Journal of Pharmacology. 64. (1994)
[Publications] T.Yanagita R.Yamamoto,et al.: "Protein Kinase C and down-regulation of voltage-dependent Na channel in bovine adrenal medulla cells." Japanese Journal of Pharmacology. 64. (1994)
[Publications] A.Wada,Y.Uezono,R.Yamamoto,et al.: "Negative modulation of voltage-dependent sodium channel by the channel activator in cultured bovine adrenal medullary cells." Japanese Journal of Pharmacology. 64. (1994)
[Publications] H.Niina,A.Wada et al.: "Brevetoxin PbTx-3 binds to a new neurotoxin receptor and causes allosteric activation of voltage-dependent sodium channel in cultured bovine adrenal medu llary cells" Japanese Journal of Pharmacology. 64. (1994)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

培養副腎髄質細胞における転写調節因子の変動とNaチャンネル発現の制御

Principal Investigator

和田 明彦 宮崎医科大学, 医学部, 教授 (30131949)

Research Products

[Publications] A.Wada,Y.Uezono,F.Izumi: "Down-regulation of voltage-dependent sodium channel and protein kinase C in cultured bovine adrenal medullary cells." Japanese Journal of Pharmacology. 61(Sup.I). 254 (1993)

[Publications] T.Yuhi,A.Wade et al.: "Characterization of〔^3H〕brevetoxin binding to voltage-dependent sodium channels in adrenal medullary cells." Naunyn-Schmiedeberg′s Archives of Pharmacology. in press. (1994)

[Publications] T.Yuhi,T.Yanagita et al.: "cAMP mediater expression of voltage-dependent Na channel in cultured bovine adrenal medullary cells." Japanese Journal of Pharmacology. 64. (1994)

[Publications] T.Yanagita R.Yamamoto,et al.: "Protein Kinase C and down-regulation of voltage-dependent Na channel in bovine adrenal medulla cells." Japanese Journal of Pharmacology. 64. (1994)

[Publications] A.Wada,Y.Uezono,R.Yamamoto,et al.: "Negative modulation of voltage-dependent sodium channel by the channel activator in cultured bovine adrenal medullary cells." Japanese Journal of Pharmacology. 64. (1994)

[Publications] H.Niina,A.Wada et al.: "Brevetoxin PbTx-3 binds to a new neurotoxin receptor and causes allosteric activation of voltage-dependent sodium channel in cultured bovine adrenal medu llary cells" Japanese Journal of Pharmacology. 64. (1994)

和田明彦宮崎医科大学, 医学部, 教授 (30131949)