1994 Fiscal Year Annual Research Report

P56^<lCK>によるT細胞抗原レセプター複合体の翻訳後合成調節機構に関する研究

Research Project

Project/Area Number	05670295
Research Institution	University of Tokyo
Principal Investigator	中山俊憲東京大学, 医学部(医), 助手 (50237468)
Keywords	P56^<lCK> / T細胞抗原レセプター / 胸腺
Research Abstract	マウスの胸腺細胞から抗CD8抗体を用いたパニンク法を用い、CD4^+CD8^+(DP)細胞を分離した。抹消成熟T細胞としては、脾臓などからナイロンウ-ルカラムを用いて分離した。これらの細胞を^<35>S-メチオニンでラベル(パルス)し、その後、正常培養液にもどしてさらに0〜6時間培養した。細胞を可溶化した後、TCRの各コンポーネントに対する抗体を駆使し免疫沈降を行った。TCRの各コンポーネントは一定の順序で会合するた7本の完全な複合体(αβγδεζζ)や、途中の2本(αβ)、3本(αβγ)、5本(αβγδε)の複合体を別々に分離することができる。この免疫沈降物を、二次元〔非還元/還元〕のSDS-PAGEに展開し、新しく合成された種々の段階の複合体の量を同定する。これらの免疫化学の実験を、DP細胞と抹消T細胞を用い、それぞれの細胞表面CD4分子を架橋刺激して、CD4に会合したP56^<lCK>チロシンキナーゼを活性化し、TCRタンパク質の翻訳後の分解、会合、細胞の局在を調べた。その結果、TCRの発現量を調節しているのは、TCRα鎖の糖鎖が関係しており、TCRの鎖の産生がDP細胞でのTCRの発現に関してカギを握っていることがわかった。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Yamashita,I.: "CD69 cell surface expression identifies developing thymocytes which audition for T cell antigen receptor-mediated positive selection." International Immunology. 5. 1139-1150 (1993)
[Publications] Nakayama,T.: "Decreased signaling competence as a result of receptor overexpression:Overexpression of CD4 reduces its ability to activate P56lck tyrosine kinase and to regulate T-cell antigen receptor expression in immature CD4+CD8+thymocytes." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 90. 10534-10538 (1993)
[Publications] Kubo,S.: "A novel form of self tolerance dictated in the thymus of transgenic mice with autoreactive T cell receptor α and β dhain genes." International Immunology. 6. 593-602 (1994)
[Publications] Benvniste,P.: "Engagement of the external domains of CD45 throsine phosphatase can regulate the differentiation of immature CD4+CD8+ thymocytes into mature T cells." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 91. 6933-6937 (1994)
[Publications] Kearse,K.P.: "Developmentalregulation of αβ T cell antigen receptor expression results from differentialstability of nascent TCRα proteins within the endoplasmicreticulum of immature and mature T cells." EMBO Journal. 13. 4504-4514 (1994)
[Publications] Wang,C-R.: "TCR-mediated signaling events in CD4+CD8+ thymocytes undergoin thymic selection:Requirement of calcineurin activation for thymic positive selection but not negative selection." Journal of Experimental Medicine. (印刷中).
[Publications] V.Reeders: "T cell development in the thymus.Handbook of Experimental Immunology.(5th ed.)" Blackwell Scientific Publications, (1994)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

P56^<lCK>によるT細胞抗原レセプター複合体の翻訳後合成調節機構に関する研究

Principal Investigator

中山 俊憲 東京大学, 医学部(医), 助手 (50237468)

Research Products

[Publications] Yamashita,I.: "CD69 cell surface expression identifies developing thymocytes which audition for T cell antigen receptor-mediated positive selection." International Immunology. 5. 1139-1150 (1993)

[Publications] Kubo,S.: "A novel form of self tolerance dictated in the thymus of transgenic mice with autoreactive T cell receptor α and β dhain genes." International Immunology. 6. 593-602 (1994)

[Publications] Benvniste,P.: "Engagement of the external domains of CD45 throsine phosphatase can regulate the differentiation of immature CD4+CD8+ thymocytes into mature T cells." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 91. 6933-6937 (1994)

[Publications] Kearse,K.P.: "Developmentalregulation of αβ T cell antigen receptor expression results from differentialstability of nascent TCRα proteins within the endoplasmicreticulum of immature and mature T cells." EMBO Journal. 13. 4504-4514 (1994)

[Publications] Wang,C-R.: "TCR-mediated signaling events in CD4+CD8+ thymocytes undergoin thymic selection:Requirement of calcineurin activation for thymic positive selection but not negative selection." Journal of Experimental Medicine. (印刷中).

[Publications] V.Reeders: "T cell development in the thymus.Handbook of Experimental Immunology.(5th ed.)" Blackwell Scientific Publications, (1994)

中山俊憲東京大学, 医学部(医), 助手 (50237468)