炎症性腸疾患における大腸細胞表面HLA内に存在するペプタイドの構造解析

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05670450
• Research Institution: University of Tokyo
• Principal Investigator: 川邊 隆夫 東京大学, 医学部(病), 助手 (40195136)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 白鳥 康史 東京大学, 医学部(病), 助手 (70196624) ; 小俣 政男 東京大学, 医学部(病), 教授 (90125914)
• Keywords: 炎症性腸疾患 / 大腸上皮細胞 / HLA

Research Abstract

炎症性腸疾患の大腸上皮はclass Iだけでなくclass IIのHLAも発現していることが知られており、近年のHLAの研究により、抗原は細胞膜上でHLAに抱かれたアミノ酸9〜13個のペプタイドとして存在することが明らかとなった。そこで本研究では炎症性腸疾患の大腸上皮細胞のclass Iおよびclass IIのHLAに抱かれたペプタイドを分析し、cytotoxic T細胞の標的となるペプタイド(class IのHLAの研究による)および大腸上皮細胞が抗原提示しているペプタイド(class IIのHLAの研究による)を明らかにすることを目的としている。まず、手術で得られた大腸上皮細胞よりホモジネートを作成した。このサンプルを抗HLA(class I)抗体を用いたaffinity chromatographyでHLAとペプタイドの複合体を抽出した。この複合体から酸処理にてペプタイドを採取し、分子量の差によりHPLCで分別した極微量のペプタイドのsequenceを分析を試みている。しかし、現在のところはaffinity chromatographyによるHLAとペプタイド複合体の抽出の条件に若干の問題があり、十分な量と純度のものが得られていない。このため、あとのsequence分析に支障をきたしており十分な成果は得られていない。今後、affinity chromatographyの条件の再調整等を行い、良質な抽出物が得られるよう検討している。

Research Products

• [Publications] Takahashi M: "Hepatocyte growth factor induces mitogenic reaction to the rabbit gastric epithelial cells in primary culture" Biochem Biophys Res Commun. 191. 528-34 (1993)
• [Publications] Ota S: "Role of Ca^<2+> and protein lcinase C in regulation of prostaglandin E2 release by cultured rabbit gestric epithelial cells" Dig Dis Sci. 38. 1426-34 (1993)