B型肝炎ウイルスX遺伝子の肝発癌における細胞周期促進とアポトーシス誘発作用の解析

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05670451
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 小池 和彦 東京大学, 医学部(病), 助手 (80240703)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 飯野 四郎 聖マリアンナ医大, 医学部, 教授 (30010309) ; 森屋 恭爾 東京大学, 医学部(病), 医員 ; 四柳 宏 東京大学, 医学部(病), 助手 (30251234)
• Keywords: B型肝炎ウイルス / HBx遺伝子 / 細胞周期 / DNA合成 / NIH3T3細胞

Research Abstract

B型肝炎ウイルスのHBx遺伝子を、副腎皮質ホルモンにより発現誘発可能な制御領域MOUSE MAMMARY TUMOR VIRUS-LONG TERMINAL REPEATのもとに接続したプラスミドpMTVHBxを作製後、以下の様な実験を行なった。
1)pMTVHBxをNIH3T3にトランスフェクションし、安定な細胞株MTXを41株樹立した。これらから11株を選んでHBx遺伝子の発現を検討したところ、6株において副腎皮質ホルモンによってHBx遺伝子の発現が上昇した。6時間目でピークとなり、24時間で元に復した。
2)これらのMTX細胞株を血清除去によってG0/G1期とした後デキサメサゾンを添加することにより多くのMTX細胞においてDNA合成の亢進が惹起された。
3)同様の処置により、細胞周期の進行がフローサイトメトリーによって観察された。
4)しかし、形態的には形質転換は見られず、細胞密度は対照細胞株と変わらず、ヌードマウスでの腫瘍形成能も認められなかった。
これらの結果から、少なくともマウス線維芽細胞においては、HBx蛋白がDNA合成促進作用をもつことが明らかとなった。HBx遺伝子のもつmitogenic activityが生体内において持続的に発揮されることによって肝発癌に関与している可能性を示していると思われる。

Research Products

• [Publications] K.Koike: "The role of hepatitis B virus HBx gene in hepatocarcinogenesis" Liver. (in press). (1994)
• [Publications] K.Koike: "High-level expression of hepatitis B virus HBx gene and hepatocarcinogenesis in transgenic mice." Hepatology. 19(in press). (1994)
• [Publications] T.Maruyama: "The serology of chronic hepatitis B virus infection revisitod." J Clin Invest. 91. 2586-2595 (1993)
• [Publications] T.Maruyama: "Serology of acute exacerbation in chronic hepatitis B virus infection" Gastroenterology. 105. 1141-1151 (1993)
• [Publications] K.Koike: "Viral hepatitis and liver disease" Springer-Verlag Tokyo, (1994)