1993 Fiscal Year Annual Research Report
運動ニューロン疾患における軸索内輸送異常の発生機構に関する研究
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05670545
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| Research Institution | Akita University |
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Principal Investigator |
豊島 至 秋田大学, 医学部, 講師 (80108951)
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| Keywords | 運動ニューロン疾患 / 軸索内輸送 / キネシン / 細胞質ダイニン / モノクローナル抗体 / ニューロフィラメント / スフェロイド / 微分干渉顕微鏡 |
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| Research Abstract |
運動ニューロン疾患(MND)において,これまで,遅い軸索内輸送の障害が知られているが,報告者は,速い軸索内輸送障害を伴っていることを明らかにした。2つの方法を用いたが,1つは免疫組織化学によるMND患者脊髄の検討である。速い軸索内輸送のモーター蛋白質であるキネシンと細胞質ダイニンに対するモノクローナル抗体により,抗ニューロフィラメント抗体で同定されたスフェロイドが強く染色された。速い軸索内輸送障害の結果と考えられる。この過程で,,抗ウシ細胞質ダイニン中間鎖モノクローナル抗体が5個得られたが,哺乳類細胞質ダイニンに対するモノクローナル抗体としては,これがはじめてである。もう1つの方法は報告者が新たに関発した,凍結乾燥切片を用いた定量的イムノブロットである。これにより,MNDの脊髄の各部で,キネシンと細胞質ダイニンが,単位重量あたりでも,単位体積あたりでも減少しているのが見出された。本法により,凍結乾燥切片から前角などを正確に切りとり,体積を,一定の厚さであることから面積測定により求め,モル濃度の算出が可能となった。組織学的なレベルでの蛋白定量法として今後の応用も期待される。実験モデルを用いての速い軸索内輸送障害の解析を試た。ビデオコントラスト増強微分干渉顕微鏡による観察を確立したが,蛍光顕微鏡によるトレーサー解析は途上である。主な原因は一般細胞で十分な標識が,培養ニューロンには入り難いことによるもので,平成6年度に申請したマイクロインジェクターによりそれが達成されることが十分に期待される。
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[Publications] 豊島至 他: "運動ニューロン疾患におけるモーター蛋白質の変動" 神経化学. 32. 74-75 (1993)
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[Publications] 豊島至: "筋萎縮性側索硬化症と軸索内輸送" 医学のあゆみ. 168. 131-135 (1994)
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[Publications] Toyoshima I,sheetz MP: "A Icinesin Receptor on Endoplasmic Reticulum in Neuronal Cytoskeleton" ed.by Hirokawa.N,JAPAN Scientific Soc Press, 335 (1993)
