1994 Fiscal Year Annual Research Report
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05670575
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| Research Institution | Teikyo University |
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Principal Investigator |
臼杵 扶佐子 帝京大学, 医学部, 講師 (50185013)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
清水 輝夫 帝京大学, 医学部, 教授 (00107666)
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| Keywords | 糖原病II型 / acid α-glucosidase(GAA) / 筋芽細胞 / 細胞移入 / 治療 |
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| Research Abstract |
糖原病II型のモデル動物である日本ウズラ糖原病II型の筋芽細胞を用いてin vitroにおける治療実験を継続して行った。GAAは高分子前駆体として合成され、一旦細胞外へ分泌された後、再び細胞内へとりこまれmature typeへと変換される。正常筋芽細胞と欠陥筋芽細胞を混合培養しhybrid myotubeを形成させGAA活性を測定したところ、欠陥細胞の酵素活性の上昇がみられた.従って,正常細胞からのGAA前駆体が疾患細胞へとりこまれprocessingをうけていることが考えられた。正常細胞の割合を少なくし、導入細胞あたりの酵素発現を高める必要があるが、そのためには自家筋芽細胞にGAAcDNAを導入して酵素活性の高いcell lineを得る方法が考えられる。そこで、GAAcDNAを得ることを目的としたPCR実験を行い590bpのバンドが得られたが、得られたPCR産物は塩基配列を検討した結果偽産物であることが判明した。現在、λgt11ベクターにより構築されたウズラ筋肉cDNAlibraryよりさらにGAAcDNAをクローニング中である。また、今回の研究において各種血清中のGAA活性を検討したところ、血清中にもGAAが存在し、種によっては高値をとるものがあることが明らかになった。in vivoにおいて血漿交換も治療に有用である可能性があると思われる。
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