1994 Fiscal Year Annual Research Report
ジヒドロプテリジン還元酵素欠損症の分子遺伝学的研究
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05670651
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Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
松原 洋一 東北大学, 医学部, 助教授 (00209602)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
鈴木 洋一 東北大学, 医学部, 助手 (80216457)
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Keywords | ジヒドロプテリジン還元酵素 / 遺伝子変異 / フェニルケトン尿症 / ビオプテリン / PCR |
Research Abstract |
前年度に引き続き、高フェニルアラニン血症と重篤な中枢神経障害をきたすジヒドロプテリジン還元酵素(DHPR)欠損症における変異遺伝子解析を行なった。また、この変異解析に不可欠なDHPR遺伝子のゲノム構造はこれまでに報告されていないため、その決定をあわせて行なった。対象は日本人兄弟の症例で、その線維芽細胞におけるDHPR-mRNA量は著明に低下していた。PCR法によってmRNAを増幅したところ、152塩基の挿入配列が認められ、その中には終止コドンが存在していた。この終止コドンの存在によってmRNAの安定性が低下するため、その量的な変化を招いたものと考えられた。挿入配列部分を含むDHPR遺伝子のゲノム構造解析を行なった結果、この挿入塩基はエキソン3とエキソン4の接合部に位置しており、イントロン3に由来するものであることが判明した。さらに、本症例では挿入配列に隣接してA→G置換が認められた。この塩基置換はmRNAスプライシングのドナー部位に類似した配列を生じるため、上流に存在する潜在的なアクセプター部位を活性化し、その結果このイントロン部分を新たなエキソンとして認識したものと考えられた。患者兄弟はともにこの変異のホモ接合子で、その母親はヘテロ接合子であった。父親はすでに死亡しており、その検体を得ることができなかったが、いとこ婚であることから、父親も本変異のヘテロ接合子の可能性が高いと考えられる。このようにイントロンの一部を島状にエキソンとして認識するような変異は極めて珍しく、これまでにほとんど報告されていない。一方、DHPR遺伝子のゲノム構造解析によれば、本遺伝子は6個のエキソンより構成されており、そのエキソン-イントロン境界はすべてGT/AGの法則に従っていることが明かとなった。この結果は、今後の遺伝子変異解析にとって有用であると考えられる。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Y.Yao,Y.Matsubara,他: "Rapid detection of phenylketonuria mutations by non-radioactive single-strand conformation poly morphism analysis" Acta Paediatrica Japonica. 36. 231-235 (1994)
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[Publications] M.Ogasawara,Y.Matsubara 他: "Identification of two novel mutations in the methylmalonyl-CoA mutase gene with decreased levels of mutant mRNA in methylmalonic acidemia" Human Molecular Genetics. 6. 867-872 (1994)
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[Publications] M.Aoki,M.Ogasawara,Y.Matsubara 他: "Familial amyotrophic lateral sclerosis(ALS)in Japan associated with H46R mutation in Cu/Zn superoxide dismutase gene" Journal of the Neurological Sciences. 126. 77-83 (1994)
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[Publications] K.Arakawa,K.Uetanaka 他: "Analysis of PCR-product by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection and its application to the diagnosis of MCAD deficiency" Journal of Chromatography A. 680. 517-523 (1994)
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[Publications] y.Suzuki,Y.Aoki 他: "Isolation and characterization of mutations in the human holocarboxylase synthetase cDNA" Nature Genetics. 8. 122-128 (1994)
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[Publications] 松原洋一、池田博行 他: "新生児マススクリーリング対象疾患における新知見と展望:BH_4欠乏症" 小児内科. 26. 82-85 (1994)
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[Publications] 松原洋一 他: "臨床DNA診断法" 金原出版 (出版予定), (1995)
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[Publications] 松原洋一 他: "最新内科学大系" 中山書店 (出版予定), 8および69