1993 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
05670665
|
Research Institution | Gifu University |
Principal Investigator |
近藤 直実 岐阜大学, 医学部, 助教授 (50124714)
|
Keywords | 免疫不全 / 免疫グロブリン遺伝子 / 塩基配列 / クロマチン / スプライシング / Bloom症候群 / IgGサブクラス欠損 / Common variable immunodeficiency |
Research Abstract |
平成5年度には当初の計画どうり、幾つかの先天性免疫不全症候群(Commom variable immunodeficiency、Bloom症候群など)で免疫グロブリン遺伝子の再構成、switching(特に、chromatinの状態など)の異常、免疫グロブリン遺伝子の発現(特に,alternative splicing)の異常が明らかになった。これらの成績は1993日本免疫学会や1993国際サイトカイン学会で報告した。さらに異常バンドを回収しベクター(Puc19)にクローニングしSanger法により塩基配列を決定している。Switchingの異常に関し、DNA hypersensitive siteを調べるため培養細胞から核を採取しDNAase Iの効果を検出しchromatin構造の状態の異常を検索するとともに、mRNAから作成したcDNAと各種primerを用いて,polymerase chain reaction(PCR)によりgermlineCγtranscriptの形成異常を明らかにした。また、分泌型IgMと膜型IgMとは一つの遺伝子からalternative splicingにより発現することから、分泌型IgMと膜型IgMの間に解離がみられる状態の異常につき当該primerを用いて,polymerase chain reaction(PCR)によりsplicing部位を増幅させ、その塩基配列の異常を検索し、当該部位の異常を明らかにした。さらにWiskott-Aldrich症候群、Ataxia-telangiectasia,IgG subclass deficiencyについて病因遺伝子の解析がすすめられている。来年度は異常が明らかになった遺伝子を発現ベクターに組み込み発現実験で異常を確かめる一方、電気的に遺伝子導入し、各細胞株に特異的な性格(例えば、紫外線感受性など)を指標にして、その特異的な性格が改善された細胞株を選択し、その細胞株から導入遺伝子を回収し、塩基配列の異常を検出し、その病因遺伝子を明らかにする。
|
Research Products
(8 results)
-
[Publications] Naomi Kondo et.al.: "Defective calcium-dependent signal transduction in B lymphocytes of a certain common varioble immunodeficiency" Exp Clin Immunogenetics. 10. 16-20 (1993)
-
[Publications] Naomi Kondo et.al.: "Defective calcium-dependent signal transduction in T lymphocytes of ataxia-telangiectasia" Scand J Immunology. 38. 45-48 (1993)
-
[Publications] Naomi Kondo et.al.: "Expression of secreted immunoglobulin heavy chain genes and immunoglobulin secreting cells in human lymphocytes" Scand J Immunology. 38. 320-322 (1993)
-
[Publications] Naomi Kondo et.al.: "The role of T lymphocytes in patients with food-sensitive atopic dermatitis" J.Allergy Clin Immunology. 91. 658-668 (1993)
-
[Publications] Naomi Kondo et.al.: "Malignant lymphoma in a Bloom's syndrome patient treated with insulin" Clin Genetics. 44. 51-52 (1993)
-
[Publications] Naomi Kondo et.al.: "Immunoglobulin-secreting cells in primary immunodeficiency diseases" J.Invest Allergol Clin Immunol. 3. 265-267 (1993)
-
[Publications] 近藤直実他: "臨床遺伝医学[IV]癌と遺伝" 診断と治療社, 372 (1993)
-
[Publications] 近藤直実他: "小児科学年鑑1993小児科の進歩13" 診断と治療社, 212 (1993)