ソマトスタチン受容体に連関する可溶性GTP結合蛋白質の構造と機能の解析

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05670892
• Research Institution: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• Principal Investigator: 矢島 由紀子 財団法人 東京都臨床医学総合研究所, 遺伝情報研究部門, 研究員 (60090114)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 秋田 朗子 財団法人 東京都臨床医学総合研究所, 遺伝情報研究部門, 研究員 (40124432)
• Keywords: ソマトスタチン / GTP結合蛋白質 / 下垂体細胞 / 百日咳毒素

Research Abstract

本年度は従来より用いたラット下垂体由来GH4C1細胞を用いて、ソマトスタチンで刺激すると、可溶性GTP結合蛋白質が派生することを報告する。本細胞膜とソマトスタチンをインキュベートすると細胞膜からGTP結合蛋白質のalphaサブユニットが遊離し、ソマトスタチンの濃度に依存して発現した。このソマトスタチンの効果はあらかじめ細胞を百日咳毒素で前処理することにより阻害された。ソマトスタチンによって遊離したalphaサブユニットはGi2とGoのalphaサブユニットで、Gi3のalphaサブユニットは遊離しなかった。このことは本細胞でソマトスタチン受容体はGi2とGoに連関し、Gi3と連関しないことを意味する。また、intactのGH4C1細胞をソマトスタチンで8分インキュベートすると、細胞質画分にGi2のalphaサブユニットが観察され、膜画分からGi2のalphaサブユニットが18%減少した。時間的にホルモン刺激後、8分から32分まで持続的にalphaサブユニットが細胞質に遊離したが、60分のインキュベートでは減少した。一方、これに対応した膜画分中のalphaサブユニットの変動を確認した。この遊離したalphaサブユニットはbetagammaサブユニットの共存下で百日咳毒素でADP-リボシル化された。以上の結果、ホルモン刺激によって細胞膜中のalphaサブユニットが可溶化し、この可溶化したalphaサブユニットは生理的に活性を有することが示唆された。

Research Products

• [Publications] 矢島由紀子: "Somstostatin induces release of the alpha subunits of pertussis toxim-sensitine G proteins in natine membranes and in intact 〓〓〓〓〓〓 sat patiit〓〓〓〓" Mol.Cell.Endocrinol.92. 143-152 (1993)
• [Publications] 秋田朗子: "Over Production of a Ca^2± independent Protein Kinase C isozyme nPKC〓,Increases the Secretion of Prolactin from TRH-stimulated Rat" J.Biol.Chem.269. 4653-4660 (1994)