1994 Fiscal Year Annual Research Report
PCR-SSCP法による癌遺伝子をマーカーとした末梢血中癌細胞の検出
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05671028
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| Research Institution | Teikyo University |
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Principal Investigator |
沖永 功太 帝京大学, 医学部, 教授 (00101098)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
飯沼 久恵 帝京大学, 医学部, 助手 (30147102)
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| Keywords | 癌遺伝子 / 腫瘍マーカー / 消化器癌 |
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| Research Abstract |
我々はPCR-SSCP法を用いて消化器癌の末梢血中遊離癌細胞を検出し、血行性転移の早期診断を行うことを目的としている。これまでPCR-SSCP法の基礎的実験条件を確率し、胃癌および結腸癌細胞株を検討した。その結果、MKN-1(P53exon5)とSW-480(P53exon8,K-ras codon12)に点突然変異を認めた。この細胞を用いて検出可能な細胞数を検討したところ、十数個の癌細胞があれば検出可能であることが判明した。
次に、末梢血から癌細胞のみを効率よく分離する方法として、Mgnetic cell separation法を試みた。anti-human CD45モノクロナル抗体と、免疫磁気ビーズ標識anti-mouse IgG抗体を用いたところ、約90%の純度で癌細胞のみを分離できた。
現在、in vivoの実験モデルとしてヌードマウスを用いて、さらに臨床検体(進行消化器癌患者の門脈血)を使用した検討を進めている。
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