神経成長因子の発生学的見地と胎児脳及び脳形成不全におけるニューロン成熟との相関

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05671187
• Research Institution: Tokai University
• Principal Investigator: 大井 静雄 東海大学, 医学部・脳神経外科, 助教授 (30194062)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小田 真理 東海大学, 医学部・脳神経外科, 助手 (10246118) ; 下田 雅美 東海大学, 医学部・脳神経外科, 講師 (10206237) ; 松前 光紀 東海大学, 医学部・脳神経外科, 講師 (20209604) ; 竹井 太 東海大学, 医学部・脳神経外科, 講師 (00216839) ; 佐藤 修 東海大学, 医学部・脳神経外科, 教授 (00023763)
• Keywords: 神経成長因子(NGF) / 繊維芽細胞成長因子(FGF) / コリン作動性ニューロン / ニューロン成熟 / 癒合不全 / 二分脊椎 / マウス動物実験モデル / 海馬

Research Abstract

本年度の本研究の具体的内容として、動物実験モデルに癒合不全mutant mouse(C57BL/6N系Spd/Spd)を選択した結果、NGF発現動態の分析に関しては、すべて同系mouseで検索することから開始した。妊娠mouseを用い、胎生16、17、18日、および出生後0、1、2、5、7日の胎仔新生仔の脳脊髄の連続切片を作成し、HE染色、KB染色に供した。そのパラフィン固定標本より、rabbit抗NGF抗体AB927(抗原mouse顎下腺NGF)による免疫組織化学的検索を施行したが、すべてに染色反応は得られなかった。次には、凍結標本に対して同じ酵素抗体法の手順をとり通常の1000倍希釈に加え、100倍希釈の抗NGF抗体を用いてその反応性をみたが、陽性所見は得られなかった。従って、同実験動物モデルを対象とする本研究方法では、他に交差反応を有するNFG familyを用いる必要が生じたため、繊維芽細胞成長因子FGF(Fibroblast Growth Factor)を対象として上記検索を繰り返した。その結果には、FGFは、acidic FGFとbasic FGFのうち前者に確実な染色性を示し海馬を中心にその局在が認められた。この所見は、NGFが海馬、新皮質のニューロンで生合成され前脳基底野のコリン作動性ニューロンの軸索をアセチルコリンとは反対方向に逆行輸送され作動する、という概念に類似性を持つ可能性を示唆しているものと思われ、今後この指標を用いて発生動態からニューロン成熟異常の中での動きからその役割を追究して行く計画である。