1994 Fiscal Year Annual Research Report

筋細胞の脱分化の過程における細胞周期誘導因子活性化のシグナル伝達機構

Research Project

Project/Area Number	05680604
Research Institution	Chiba University
Principal Investigator	遠藤剛千葉大学, 理学部, 助教授 (30194038)
Keywords	筋細胞分化 / 脱分化 / SV40largeT抗原 / c-Jun / AP-1 / Rb / MyoD / myogenin
Research Abstract	誘導性のプロモーターにつないだSV40largeT抗原遺伝子をマウス骨格筋細胞株C2にトランスフェクトして得た形質転換細胞株C2SVTでは、最終分化をした筋管細胞にlargeTを発現させると、不可逆的にGO期に停止していると考えられていた細胞が脱分化をして、細胞分裂がもたらされる。この脱分化の過程において、さまざまな核内原癌遺伝子産物のうちで、c-JunのみがlargeTの発現ときわめて協調的に誘導された。これにともない、転写因子AP-1の活性化もみられた。さらにアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた実験からも、largeTによる細胞周期の再開には、誘導されたc-JunがおそらくホモダイマーでAP-1として機能することが不可欠であると考えられる結果が得られた。また、筋芽細胞と筋管細胞にlargeTを発現させても、フォスフォチロシン量の増大、フォスフォリパーゼCの活性化、Rasの活性化(結合GTP/GDP比の増大)、およびMAPキナーゼの活性化はみられなかった。したがって、核内に局在するlargeTは、これらの細胞質のシグナルを活性化せずに、AP-1などの核内の転写因子を活性化することにより、細胞周期を誘導するものと結論される。さらに、largeTが増殖抑制因子の機能を抑制することにより細胞周期の再開をもたらす可能性についても検討するために、largeTがRb以外に増殖抑制能をもつMyoDやmyogeninに結合するかどうかを調べた。その結果、大腸菌に発現させたGST-MyoDおよびGST-myogeninは、バキュロウイルス/Sf9細胞の系で発現させたlargeTと結合することが示された。現在、MyoDあるいはmyogeninとlargeTがそれぞれのどの領域で結合するか、またこの結合によりMyoD,myogeninの増殖抑制機能が阻害されるかどうかを調べている。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] T.Endo: "SV40large T inhibits myogenic differentiation partially through inducing c-jun." J.Biochem.112. 321-329 (1992)
[Publications] T.Endo: "Retinoblastoma gene product Rb accumulates during myogenic differentiation and is deinduced by the expression of SV40 large T antigen." J.Biochem.112. 427-430 (1992)
[Publications] K.Fukami: "α-Actinin and vinculin are PIP_2 binding proteins involved in signaling by tyrosine kinase." J.Biol.Chem.269. 1518-1522 (1994)
[Publications] T.Sakurai: "Activin A stimulates mitogenesis in Swiss 3T3 fibroblasts without activation of mitogen-activated protein kinases." J.Biol.Chem.269. 14118-14122 (1994)
[Publications] Y.Ohkubo: "SV40 large T antigen reinduces the cell cycle in terminally differentiated myotubes through inducing Cdk2,Cdc2,and their partner cyclins." Exp.Cell Res.214. 270-278 (1994)
[Publications] N.Hashimoto: "Pnosphorylation of a proline-directed kinase motif' is responsible for structural changes in myogenin." FEBS Lett.352. 236-242 (1994)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

筋細胞の脱分化の過程における細胞周期誘導因子活性化のシグナル伝達機構

Principal Investigator

遠藤 剛 千葉大学, 理学部, 助教授 (30194038)

Research Products

[Publications] T.Endo: "SV40large T inhibits myogenic differentiation partially through inducing c-jun." J.Biochem.112. 321-329 (1992)

[Publications] T.Endo: "Retinoblastoma gene product Rb accumulates during myogenic differentiation and is deinduced by the expression of SV40 large T antigen." J.Biochem.112. 427-430 (1992)

[Publications] K.Fukami: "α-Actinin and vinculin are PIP_2 binding proteins involved in signaling by tyrosine kinase." J.Biol.Chem.269. 1518-1522 (1994)

[Publications] T.Sakurai: "Activin A stimulates mitogenesis in Swiss 3T3 fibroblasts without activation of mitogen-activated protein kinases." J.Biol.Chem.269. 14118-14122 (1994)

[Publications] Y.Ohkubo: "SV40 large T antigen reinduces the cell cycle in terminally differentiated myotubes through inducing Cdk2,Cdc2,and their partner cyclins." Exp.Cell Res.214. 270-278 (1994)

[Publications] N.Hashimoto: "Pnosphorylation of a proline-directed kinase motif' is responsible for structural changes in myogenin." FEBS Lett.352. 236-242 (1994)

遠藤剛千葉大学, 理学部, 助教授 (30194038)