哺乳類初期胚におけるP34^<cdc2>蛋白質リン酸化酵素活性の調節機構について

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05760208
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 青木 不学 東京大学, 農学部, 助手 (20175160)
• Keywords: 初期胚 / 初期発生 / チロシン脱燐酸化酵素 / アンチセンスDNA

Research Abstract

昨年度までの研究により、マウス初期胚においてmRNAレベルで多量に発現しているチロシン脱燐酸化酵素(protein tyrosine phospatase,PTP)として、T-cell PTP(TPTP)を同定した。本年度は、TPTPの抗体を作製し、その蛋白質レベルでの発現量の変化を初期胚において調べた。さらに、アンチセンスDNAを培養液に加えて胚に取り込ませ、TPTPの発現を止めることにより、その初期発生における役割を明らかにすることを試みた。
まず、TPTPのN末端側のアミノ酸配列に対する抗体を作製し、免疫組織学的手法により、初期胚でのTPTP蛋白質の発現を調べた。TPTPは未受精卵においては、原形質膜上に検出できた。さらに、受精後、1細胞から2細胞期にかけては細胞質全体に多量に発現していた。そして、桑実胚から胚盤胞期にかけて、再び原形質膜上に局在した。
次に、アンチセンスDNAを桑実胚期より培養液に加えたところ、胚盤胞期の胚ではTPTP蛋白質量が著しく減少していた。この時、胚盤胞への発生率にはまったく影響が見られなっかったが、細胞数が有為に増加していた。
以上により、TPTPはマウスの初期胚において、発現パターンに変化があること、さらに、分裂に対して抑制的な機能を持つことが明らかとなった。

Research Products

• [Publications] Sobajma,T.,Aoki,F.,Kohmoto,K.: "Activation of mitogen-activated protein kinase during meiotic maturation in mouse oocytes" Journal of Reproduction and Fertility. 97. 389-394 (1993)