心筋症ハムスター(Bio14.6)心筋膜異常の細胞骨格系タンパク質からの解明

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05770039
• Research Institution: National Cardiovascular Center Research Institute
• Principal Investigator: 岩田 裕子 国立循環器病センター研究所, 循環分子生理部, 室員 (80171908)
• Keywords: 心筋症 / 心筋症ハムスター / ジストロフィン / 細胞骨格系タンパク質 / 膜異常 / ジストロフィン結合タンパク質 / 免疫沈降 / 免疫蛍光染色

Research Abstract

今年度の研究により,心筋症発症前のBio14.6心筋における膜機能蛋白質の膜分画への回収異常として探知される膜異常には,細胞膜裏打ち構造保持に関与する細胞骨格系タンパク質の異常が関与することが明らかにされた.特にジストロフィンにおいては、Bio14.6心筋ホモジェネートでは、対照ハムスター心筋含有量の約50%にもかかわらずミクロゾーム分画に対照の4倍以上回収されるという異常が検知され、両ハムスターでジストロフィンの細胞内分布には異常ないことから膜とジストロフィンとのassociationにBio14.6心筋では何らかの異常が存在すると結論された。そこでウサギ骨格筋において膜とジストロフィンとのassociationに関与するということで既にその存在が知られているジストロフィン結合糖蛋白質(43,50,150K,DAP)異常の有無を検討した。対照に比しBio14.6心筋ホモジェネートにおいて、43K DAP量の60%減少さらに50K,150K量の著しい(80-90%)減少が認められた。さらに,WGAビーズまたはジストロフィン抗体ビーズを用いた実験より,ジギトニン存在下に対照ハムスター心筋ジストロフィンは、50K,43K,150K DAP等との複合体として部分精製されるが、Bio14.6心筋ジストロフィンは各アフィニティービーズで上記3種の糖蛋白とは離れて回収されることを見いだした。正常細胞ではジストロフィンと同様,50K,43K DAPは細胞膜及びT管膜に存在したが,Bio14.6心筋の50K DAPは細胞膜に検出できなかった。しかし50K DAP以外の細胞内局在は両ハムスター間で大きな差はなかった。
以上今年度の成果より心筋症ハムスター心筋壊死の一因としてジストロフィン結合蛋白質50K DAPの細胞膜欠損によるジストロフィン-DAP複合体形成異常の存在が示唆された。

Research Products

• [Publications] 岩田 裕子: "Defective association of dystrophin with salcolemmal glycoprotein in the cardio myopathic hamster heart" FEBS Lett.329. 227-231 (1993)
• [Publications] 岩田 裕子: "Altered membrane-dystrophin association in the cardiomyopathic hamster heart" Biochem.Biophys.Res.Commun.190. 589-595 (1993)
• [Publications] 岩田 裕子: "正常及び心筋症ハムスター心筋における膜イオン輸送タンパク質の細胞内分布の比較検討" 心筋の構造と代謝. 15. 47-53 (1993)
• [Publications] 岩田 裕子: "心筋症ハムスター(Bio14.6)心筋におけるジストロフィン結合蛋白質の異常" 心筋の構造と代謝. 16. (1994)