胃腸上皮化生及び胃癌において高頻度に欠失する遺伝子の解析

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05770121
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 国安 弘基 広島大学, 医学部, 助手 (00253055)
• Keywords: cripto / 遺伝子欠失 / 胃癌 / 腸上皮化生

Research Abstract

われわれは、cripto cDNAを用いたサザンブロット法により、胃癌及び腸上皮化生粘膜において高頻度に欠失するsignalを約2.2kbのサイズに発見していたが、この2.2kb signalを同定するため、以下のように研究を施行した。
上記の2.2kb signalの欠失していない、大腸癌細胞株WiDrから高分子DNAを抽出し、アガロースゲル電気泳動にて展開した後、2.2kbを中心とするゲルを切り出した。このゲル断片からDNAを抽出し、charomidベクターにライゲートした。これらのクローンを対象として、cripto cDNAを用いたプラーク ハイブリダイゼーション法を行ったところ、8個の候補となるクローンが得られた。
現在、これらのクローンのキャラクタライゼーションを行っているが、そのうちの1クローンにおいて、シークエンシングにて明らかとなった部分的塩基配列を用い、相同性の検索を行ったところ、チトクロームP450酵素系の遺伝子と約60%の相同性を有することが明らかとなった。現在、さらに、残る塩基配列のシークエンシングを行っている。さらに、本遺伝子の全容を解明するため、ヒト ゲノム ライブラリーを入手し、スクリーニングの準備を行っている。
また、これとは別に、上記の欠失が見られる遺伝子がcripto遺伝子か、または、その関連遺伝子である可能性も考慮し、既に行ったノーザンブロット法にてcripto mRNAの発現が見られなかったMKN-28胃癌細胞株から、cDNAライブラリーを作成しつつある。

Research Products

• [Publications] Kuniyasu,H.: "Aberrant expression of c-met mRNA in human gastric carcinomas" Int.J.Cancer. 55. 72-75 (1993)
• [Publications] Kitadai,Y.: "Expression of amphiregulin,novel gene of the epidermal growth factor family, in human gastric carcinomas" Jpn.J.Cancer Res.84. 879-884 (1993)
• [Publications] Yoshida,K.: "Expression of growth factors and their receptors in human esophageal carcinomas:regulation of expression by epidermal growth factor and transforming growth factor a" J.Cancer Res.Clin.Oncol.119. 401-407 (1993)
• [Publications] Yokozaki,H.: "Biologic effect of human hepatocyte growth factor on human gastric carcinoma cell lines" Int.J.Oncol.3. 89-93 (1993)
• [Publications] Kuniyasu,H.: "Expression of cripo in human gastric carcinomas:an association with tumor stage and prognosis" Exp.Clin.Cancer Res.(in press). (1994)