ヒト線維芽細胞からの癌浸潤促進因子の分離

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05771549
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 林堂 安貴 大阪大学, 歯学部, 助手 (70243251)
• Keywords: 細胞浸潤 / 蛋白分解酵素 / 上皮-間葉相互作用

Research Abstract

我々はこれまで、in vitro浸潤モデルを用い口腔扁平上皮癌細胞の浸潤機構の解析を行なってきた。その結果、ヒト正常歯肉由来線維芽細胞の産生する液性因子が扁平上皮癌細胞の遊走能と蛋白分解活性を促進することを見い出した。今回、線維芽細胞の培養上清より癌細胞の遊走促進因子と蛋白分解活性促進因子の分離・精製を試みた。ヒト正常歯肉由来線維芽細胞を無血清培地で培養して得られた条件培地を限界濾過で濃縮後、蒸留水にて透析したものを凍結乾燥し、Superdex 200pgゲルクロマトグラフィーカラム、ヘパリン親和性クロマトグラフィー及びMono Q陰イオン交換クロマトグラフィーカラムにFPLCシステムを用い展開・溶出させた。その結果、癌細胞に対し強いchemotaxis活性を示す50〜70kDaの画分と癌細胞のウロキナーゼ型プラスミノーゲンアクチベータ-(u-PA)とゼラチナーゼ産生を亢進させる200〜300kDaの画分が分離された。今後、これらの因子の精製をすすめ、モノクローナル抗体の作製を計画している。

Research Products

• [Publications] Y.HAYASHIDO: "Effect of Epidermal Growth Factor on Invasion of Human Squamous Cell Carcinoma Cells into Collagen Gel" CANCER JOUNAL 4. 4. 257-261 (1991)
• [Publications] K.SHIRASUNA: "Extracellular Matrix Production and Degradation by Adenoid Cystic Carcinoma Cells:Participation and of Plasminogen Activator and Its Inhibitor in Matrix Degradation" CANCER RESEARCH. 53. 147-152 (1993)