『新生仔ラットの顔面神経核に出現するエストロゲン受容体タンパク』

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05804050
• Research Institution: TOKYO METROPOLITAN INSTITUTE FOR NEUROSCIENCE
• Principal Investigator: 林 しん治 (財)東京都神経科学総合研究所, 解剖発生学研究部門, 副参事研究員 (20076996)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 折笠 千登世 (財)東京都神経科学総合研究所, 解剖発生学研究部門, 流動研究員 (20270671) ; 岡村 裕昭 (財)東京都神経科学総合研究所, 農水省畜産試験場, 研究員 (60213972)
• Keywords: エストロゲン受容体 / 運動ニュウロン / 発達 / 免疫組織化学 / 遺伝子発現 / 顔面神経核 / 聴覚野 / ラット

Research Abstract

新生仔ラット顔面神経核内に一過性に出現するエストロゲン受容体(ER)免疫活性の性質を他の部域に検出されるERとの比較を行いながら検討した。ラット脳内に検出されるERタンパクは2型に大別できた。第1型は成熟ラットで検出される分布域に新生仔期にすでに検出されるもの(成熟型)、第2型は新生仔期のみに一過性に検出され、成熟後は検出されないもの(新生仔型)である。第1型は視束前核・分界条床核・視床下部弓状核・視床下部腹内側核・脳室周囲核・腹側手綱核・中脳灰白質・扁桃体内側核・扁桃体皮質核等に検出されたものであり、第2型は顔面神経核内側亜核と大脳皮質聴覚野第5層である。これら両型ともエストロゲン投与によって免疫活性は抑制され、ERmRNAの発現をin situ hybridiztionによって検出することができた。一方、第1型のER含有ニュウロン分布域は、エストロゲンをアンドロゲンに転換する酵素であるアロマターゼの分布域とほぼ一致していたが、第2型の分布域にはアロマターゼが検出されなかった。雌雄間の差も、第1型には存在したが第2型には検出されなかった。これらのことから、脳の性分化に直接的に関与しているのは第1型であり、第2型は脳の性差に関与するよりもむしろニュウロンの一般的な発育に関与している可能性が示唆された。
顔面神経核内側亜核のER含有ニュウロンの投射域を軸策内逆行性標識法を用いて検討した。標識物質を後部耳介筋に微量注入したところ、ER含有ニュウロンのごく一部の細胞のみが標識された。一方標識物質を顔面神経に直接投与すると全てのER含有ニュウロンが標識された。さらに、運動ニュウロンのマーカーであるコリンアセチル転移酵素(ChAT)とERとの同一ニユウロン内共存を2重免疫染色で検討したところ、全てのER含有細胞にChAT陽性反応が見られた。また、電子顕微鏡を用いた免疫組織化学では、ER陽性細胞の微細構造がER陰性である運動ニュウロンと極めて類似していた。以上の観察から、顔面神経核内側亜核のERを一過性に発現する細胞は、未熟な運動ニュウロンであることが示唆された。

Research Products

• [Publications] Patchev,V.K,Hayashi,S.,Orikasa,C and Aimeida,O.X.F.: "Implications of estrogen-dependent brain organization for gender differences in hypothalamo-pituitary-adrenal regulation." FASEB J.(1995). (in press). (1995)
• [Publications] 横須賀誠・林しん治: "脳の性分化-発達段階の性ステロイドホルモンの作用を中心に" 脳と精神の医学5(4). 5. 401-410 (1994)
• [Publications] Yokosuka,M,Okamura,H.and Hayashi,S.: "Transient expression of estrogen receptor-immunoreactivity(ER-IR)in the layer V of the developing rat cerebral cortex" Dev.Brain Res.,. 84. 99-108 (1995)
• [Publications] Hayashi,S: "Immunocytochemical detection of estrogen receptor in the facial nucleus of the newborn rat by three antibodies with distinct epitopes." Hormones and Behavior,. 28. 530-536 (1994)
• [Publications] Okamura,H.,Yokosuka,M.and Hayashi,S.: "Induction of substance P-immunoreacitvity by estrogen in neurons containing estrogen receptor in the anteroventral perivetricular nucleus of female but not male rats." J.Neuroendocrinology,. 6. 609-615 (1994)
• [Publications] Okamura,H.,Yokosuka,M.and Hyashi,S.: "Estrogenic induction of NADPH-diaphorase activity in the preoptic neurons containing estrogen receptor immunoreactivity in the female rat." J.Neuroendocrinology,. 6. 597-601 (1994)
• [Publications] Okamura,H.,Yokosuka,M.McEwen,B.S.and Hayashi,S.: "Colocalization of NADPH-diaphorase and estrogen receptor immunoreactivity in the rat ventromedial hypothalamic nucleus:Stimulatory effect of estrogen on NADPH-diaphorase activity" Endocrinology. 135. 1705-1708 (1994)
• [Publications] Orikasa,C.,Okamura,H.,and Hayashi,S.: "Estrogen found in the facial nucleus of the newborn rat is suppressed by exogenous estrogen:Immuno-and in situ hybridization histochemical studies." Dev.Brain Res.,. 82. 9-17 (1994)
• [Publications] Sato,T.,Chiba,A.,Hayashi.S.,Okamura,H.,Ohta,Y.,Takasugi,N.and Iguchi,T.: "Induction of estrogen receptor and cell division in genital tracts of male mice by neonatal exposure to diethylstillbestrol." Reproductive Toxicology,. 8. 145-153 (1994)
• [Publications] Kikuta,T.,Yamamoto,K.,Namiki,H.and Hayashi,S.: "Immunocytochemical localization of estrogen receptor in various anterlor pituitary hormone cells of adult male and female rats." Acta Histochem.Cytochem.,. 26. 609-614 (1993)