酵素を用いるペプチド合成,とくにひとインシュリンの全合成

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05806014
• Research Institution: University of East Asia
• Principal Investigator: 森原 和之 東亜大学, 工学部, 教授 (80230142)
• Keywords: ぶたインスリン / ひとインスリンの全合成 / V8プロテアーゼ / ペプチド合成

Research Abstract

1)ぶたインスリンを原料として,過蟻酸々化によりS-S架橋と解裂,A鎖とB鎖を分離した後,それぞれにStaphy lococcus aureus V8プロテアーゼを作用。分解物をSDS-ポリアクリルアシドゲル電気泳動を行った後,転写用装置を用いてメンブレンフィルターに転写,各フラグメントについてアミノ酸配列を調べ,図1の各フラグメントに対応することを確認した。
2)V8プロテアーゼによるペプチド合成反応を調べる目的で,Z-glu+PheOMe→Z-glu-Phe-OMeの反応條件を調べた。生成物の検出はTLCを用いて行った。0.1M原料濃度,pH7.0,室温、1晩の反応で高濃度有機溶媒の存在下,反応は合成方向にシフトされることが分った。定量法を検討中である。