1993 Fiscal Year Annual Research Report
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05807086
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| Research Institution | Shiga University of Medical Science |
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Principal Investigator |
越智 幸男 滋賀医科大学, 医学部, 教授 (90079773)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
乾 武広 滋賀医科大学, 医学部, 助手 (20213134)
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| Keywords | TSHレセプター / TSHレセプター抗体 / 阻害性TSH受容体抗体 / 甲状腺細胞膜 / モルモット脂肪膜 |
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| Research Abstract |
阻害性抗体(TSBAb)の甲状腺細胞膜におよぼす影響について検討した。
1.単離ブタ甲状腺細胞膜にてフォルスコリン、GTPγS、NaFなどのcAMP増加作用をTSBAbは抑制しなかったので、post receptor(R)での作用はないと推定した。
2.TSBAbがTSH(R)に直接作用するか否かについて、TSBAbをブタ甲状腺細胞膜またはモルモット副睾丸脂肪膜での吸収実験から、TSBAbはTSH(R)を介するものと介さないものがあることが推定された。
3.可溶化甲状腺細胞膜でウサギを免疫し、作成された細胞膜抗体はTSBAb活性が陽性であるが、TBII(TSH binding inhibitory immunoglobulin)活性は陰性であった。この動物実験は、ヒトの場合と全く同一とはいえないが、ヒトの場合でもTBIIが必ずしもTSBAbの必須条件でないことを示唆するものと思われる。
4.λgt-11ファージにヒトTSH(R)cDNA[細胞外領域を150残基ずつの3部分(13〜168残基、159-308残基、299〜448残基)]を組み込んだのち大腸菌(Y1090)に感染させ、ガラクトシダーゼとの融合蛋白としてのTSH(R)部分を作成し、標識TSHとの結合からTSH(R)のN端の方に多くTSHが結合することを報告した。
この標識TSHのTSH(R)への結合抑制実験から、TSAb(甲状腺刺激抗体)もTSBAbもTSH(R)のN端に主に結合することを見い出した。また、TSH(R)をトランスフェクトしたCHO細胞にてTSHのcAMP増加反応におよぼすTSBAbの影響を検討している。
さらに、TSH(R)cDNAをmaltose binding protein(MBP)発現ベクターに挿入したのち、大腸菌にてMBPとTSH(R)蛋白を融合蛋白として生成し、このTSH(R)蛋白と^<125>I標識TSHの結合性やTSH(R)蛋白抗体を作成してTSBAbの作用機序を検討中である。
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[Publications] Takehiro Inui: "Reaction of TSH and TSH receptor antibody with λgt 11-expression products of TSH receptor gene." Life Sci.Adv.-Exp.Clin.Endocrinol.(in press).
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[Publications] Takehiro Inui: "Production of thyroid stimulation blocking antibody without TSH receptor binding activity in rabbits with experimental autoimmune thyroiditis." Hormone and Metabolic Research. 26(1). 5-8 (1994)
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[Publications] Wen Chen: "Stimulatory action of pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide(PACAP)on thyroid gland." Biochemical and Biophysical Research Communications. 194(2). 923-929 (1993)
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[Publications] 越智 幸男: "甲状腺疾患における抗TSH抗体について." 日本内分泌学会雑誌. 69(1). 1-8 (1993)
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[Publications] 越智 幸男: "バセドウ病." 臨床検査. 37(6). 629-635 (1993)
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[Publications] Takehiro Inui: "80 years of Hashimoto Disease(eds.S.Nagataki,T.Mori and K.Torizuka)" Elsevier Science Publishers B.V.,Amsterdam,Netherlands, 721 (1993)
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[Publications] Yukio Ochi: "Progress in Clinical Biochemistry(eds.K.Miyai,T.Kannno and E.Ishikawa)" Elsevier Science Publishers B.V.,Amsterdam,Netherlands, 1213 (1992)
