1993 Fiscal Year Annual Research Report
未知の糖タンパクホルモン天然型及びその異常症を予測するアルゴリズムの構築
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05807091
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| Research Institution | Koshien University |
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Principal Investigator |
宮井 潔 甲子園大学, 栄養学部・栄養学科, 教授 (30028394)
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| Keywords | 糖タンパクホルモン / 生物活性 / アミノ酸配列モチーフ / 天然ホルモン / 変異ホルモン |
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| Research Abstract |
1.糖タンパクホルモンのアミノ酸配列と機能:天然糖タンパクホルモンbeta鎖のCys(C)-Ala(A)-Gly(G)-Tyr(Y)-Cys(C)領域におけるアミノ酸配列のデータベースから検索した結果、ほとんど相同性があるが、ラットFSHでC-Glu(E)-G-Y-C,Chumサケゴナドトロピン(Gn)でC-A-G-Leu(L)-C,Chinookサケ及びウサギGnでC-Ser(S)-G-His(H)-Cの変異がみられた。また先天性TSH単独欠損症のTSHbeta鎖ではC-A-Arg(R)-Y-Cの変異がある。site directed mutagenesisではヒト(h)TSHbeta鎖でC-A-R-Y-Cの変異で活性を失い、hCGbeta鎖では、C-A-R-Y-CやC-A-Asp(D)-Y-Cで活性を失うが、C-D-G-Y-Cでは失わないというデータから総合的にC-X-G-X-Cモチーフが重要であることが分かった。
2.C-X-G-Cモチーフの検索:上記以外のC-X-G-X-Cモチーフを検索した結果、commonalpha鎖にCys(C)-Met(M)-Gly(G)-Cys(C)-Cys(C)という配列が見出され、種間でも保存されていることが分かった。
3.alpha鎖CMGCC領域のsite directed mutagenesis:正常hCGbeta鎖のmRMAと、種々の変異alpha鎖mRNAをXenopus oocyteにmicroinjectionし、得られた変異hCGの免疫活性と生物活性を調べた。その結果、いずれも免疫活性は保たれていた。生物活性は、Tyr(Y)-M-G-C-C,C-M-R-C-C,C-M-A-C-C,C-M-D-C-Cではいずれも消失し、C-R-G-C-Cでは保たれていた。
以上、天然及び変異糖タンパクホルモンのアミノ酸配列とsite directed mudtagenesisの実験から、alpha鎖のC-M-G-C-Cとbeta鎖のC-A-G-Y-C領域におけるC-X-G-X-Cモチーフの重要性が明らかにされ、高次構造予測のアルゴリズムを構築するための基礎データが得られた。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] Miyai,K,Tatsumi.K.Kusunoki.M.Ashida.N.: "Congenital dificiency of thyrotropin" Progress in Endocrinology(edsR.Mornex et al)Parthenon Pub.U.K.313-317 (1993)
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[Publications] 巽圭太、網野信行、宮井潔: "下垂体性クレチン症の病因解析-新しい病患単位の発見-" 臨床病理. 41. 533-540 (1993)
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[Publications] Kikuchi.T.Koyama.M.,Miyai.K.Kimura.T.Nishikiori.N.Kimura.T.Azuma.C.Kusuncki.M.Saji.F.Tanizawa.O.: "Loss of biological activity of human chonionic gonadotnopin(hCG)by the amino acid Substitution on “CMGCC"region of alphaSubunit" Molecul.Cellul.Endocrinol.(in press).
