細菌のスーパー抗原は歯周炎の新しい原因物質となるか

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05807171
• Research Institution: IWATE MEDICAL UNIVERSITY
• Principal Investigator: 金子 克 岩手医科大学, 歯学部, 教授 (60048270)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 根本 優子 岩手医科大学, 歯学部, 助手 (10164667) ; 佐々木 実 岩手医科大学, 歯学部, 講師 (40187133)
• Keywords: Streptococcus pyogenes / Streptococcus anginosus / Streptococcal pyrogenic exotoxi / スーパー抗原 / サイトカイン / マイトジェニックファクター / 歯周炎

Research Abstract

Streptococcus pyogenesのSPE遺伝子をPCRにより分離し、発現ベクターに取込みGST融合タンパクとして精製した、リコンビナントSPEC(rSPEC)によって誘導されるサイトカインmRNAと、T細胞VβレパートリーをRT-PCR法で検討した。さらに、口腔レンサ球菌培養上清についてヒト末梢血単核細胞(PBMC)を幼若化するマイトジェニックファクター(MF)のスクリーニングと、Streptococcus anginosusが産生するMFの部分精製を行いその生物活性を検討した。
rSPECはヒトPBMCの増殖を促進した.RT-PCRによりrSPEC反応性のT細胞Vβレパートリーを検索するとVβ2を有するT細胞の増殖が認められた。また、ヒトPBMC中のサイトカインmRNAの発現におよぼすrSPECの影響について検討したところ,TNFα,TNFβ、IFNγ,IL-2mRNAの増加を認めた。さらに、PBMC培養上清にTNF活性とIL-2を検出し、rSPECがヒトT細胞のTh1を活性化することを明らかにした。
口腔レンサ球菌培養上清についてMF産生のスクリーニングを行い,S.anginosusがMFを産生することを見いだした。S.anginosus培養上清をDEAE-SephacelおよびSephadex G-100カラムクロマトグラフィーで分画し、SDS-PAGEで数本のバンドにまでMFを部分精製した。このMFは0.01μg/mlから1μg/mlの範囲で用量依存的にヒトPBMCを幼若化し、比活性は粗画分にくらべ4.4倍高まった。

Research Products

• [Publications] 佐々木実、金子克 ら: "Streptococcus anginosusが産生するマイトジェニックファクターの部分精製" 岩手医大歯学雑誌. 19. 164-168 (1994)
• [Publications] Y.Ohara-Nemoto,M.Kaneko et al.: "Cysteine protease activity of Streptococcal pyrogenic exotoxin B." Can.J.Microbiol.40. 930-936 (1994)