1996 Fiscal Year Annual Research Report
新しい膜結合型細胞増殖因子HB-EGFによるジャクスタクライン機構の解明
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06044214
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| Research Institution | Kurume University |
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Principal Investigator |
目加田 英輔 久留米大学, 分子生命科学研究所, 教授 (20135742)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
KLAGSBRUN Mi ハーバード大学, チルドレンズホスピタル, 教授
関口 清俊 大阪府立母子保健総合医療センター研究所, 教授 (50187845)
東山 繁樹 大阪大学, 医学部生化学教室, 助手 (60202272)
三田村 俊秀 大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (80268846)
馬田 敏幸 久留米大学, 分子生命科学研究所, 助手 (30213482)
岩本 亮 久留米大学, 分子生命科学研究所, 助手 (10213323)
常岡 誠 久留米大学, 分子生命科学研究所, 講師 (50197745)
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| Keywords | ジャクスタクライン / インテグリン / HB-EGF / CD9 / TM4ファミリー / ヘパラン硫酸プロテオグリカン / 膜結合型細胞増殖因子 |
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| Research Abstract |
膜結合型細胞増殖因子HB-EGFは、本研究の共同研究者である東山繁樹、クラグスバーンらによって1991年に見いだされた新しい増殖因子であるが、一方で目加田がこれまで広範な解析を進めてきたジフテリア毒素リセプターでもある。本研究は、ジフテリア毒素の側からの目加田のグループのこれまでの知見、解析方法、実験材料に関する集積と、HB-EGFの発見者であるクラグスバーン博士の増殖因子の側からの知見を総合して、HB-EGFのジャクスタクライン機構についての解析を行うことを目的としている。今年度は細胞接着に依存したHB-EGFの増殖促進作用解析系の確立を目指して以下の成果を得た。
(1)膜に結合したHB-EGFによる増殖促進効果を無固定の細胞を使って測定できる系を構築するために、分泌型のHB-EGFができないようにプロテアーゼ切断部位を改変したHB-EGFの作成を試み、これに成功した。
(2)この細胞にEGFファミリーリガンド依存的に増える細胞を重層して、未固定でジャクスタクライン活性が測定できる系を確立した。
(3)HB-EGF-DRAP27/CD9-インテグリン複合体にアソシエ-トする他の分子の同定を試み、CD9と同じTM4ファミリーに属するCD63とCD81もこの複合体に含まれていることを明らかにした。
(4)これらの分子がCD9同様にHB-EGFのジャクスタクライン活性を上昇させるかどうかを調べ、CD81はCD9と同程度の上昇活性を示したが、CD63はCD9ほどHB-EGFのジャクスタクライン活性を上昇させず、TM4ファミリーの間で機能分担があることが示唆された。
(5)現在ヘパラン硫酸プロテオグリカン、インテグリンα3β1とジャクスタクライン活性の関りをこの系を用いて解析中である。
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[Publications] Nakagawa,T.: "Amino-terminal processing of cell surface heparin-binding EGF-like growth factor upregulates its juxtacrine but not its paracrine growth factor activity." J.Biol.Chem.271. 30858-30863 (1996)
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[Publications] Shishido,Y.: "Heparin-like molecules on the cell surface patentiate binding of diphtheria toxin to the diphtheria toxin receptor/membraneanchored heparin-binding EGF-like growth factor" J.Biol.Chem.270. 29578-29585 (1995)
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[Publications] Goishi,Y.: "Phorbol ester induces the rapid processing of cell surface heparin-binding EGF-like growth factor ; Conversion from juxtacrine to paracrine growth factor activity." Mol.Biol.Cell. 6. 967-980 (1995)
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[Publications] Nakamura,K.: "Membrane anchored heparin-binding EGF-like growth factor and DRAP27/CD9 form a complex with integrin 31 at cell-cell contact sites." J.Cell Biol.129. 1691-1705 (1995)
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[Publications] Higashiyama,S.: "The membrane protein CD9/DRAP27 potentiates the growth factor activity of the membrane-anchored heparin-binding EGF-like growth factor (HB-EGF)." J.Cell Biol.128. 929-938 (1995)
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[Publications] Mitamura,T.: "Diphtheria toxin binds to the EGF-like domain of human heparin-binding EGF-like growth factor/diphtheria toxin receptor and inhibits specifically its mitogenic activity." J.Biol.Chem.270. 1015-1019 (1995)
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[Publications] Iwamoto,R.: "Heparin-binding EGF-like growth factor,which acts as the diphtheria toxin receptor,forms a complex with membrane protein DRAP27/CD9,which up-regulates functional receptors and diphtheria toxin sensitivity." EMBO J.13. 2322-2330 (1994)
