1994 Fiscal Year Annual Research Report
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06261215
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
饗場 弘二 名古屋大学, 理学部, 教授 (20025662)
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| Keywords | グルコース効果 / カタボライト抑制 / CRP / cAMP / 大腸菌 / ラクトースオペロン / 自己制御機構 |
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| Research Abstract |
1)グルコースによるラクトースオペロンの発現抑制(カタボライト抑制)は、細胞内cAMPレベルの低下で生じるという従来の説を再検討し、このモデルが不十分であることを明らかにした。
2)ウエスタンプロット法およびゲルシフト法により、グルコースが細胞内CRPレベルを数倍低下させることを明らかにした。
3)グルコースによるCRPレベルの低下がカタボライト抑制の原因の一つとして重要であることを明らかにした。また、カタボライト抑制はCRPレベルとcAMPレベルの低下により引き起こされるとの新モデルを提唱した。
4)S1マッピング法により、グルコースによるCRPレベルの低下は、crpmRNAレベルの低下によること、また、グルコースはcrpmRNAの安定性には影響しないこと、従ってこの低下は、crp転写量の低下によることを証明した。
5)グルコースによるcrp発現の抑制には、crpプロモーターが必要であること、また、cAMPとCRPが要求されることを明らかにした。
6)グルコースによるcrp発現の抑制には、crpプロモーター上流にあるCRP結合部位が必須であることを明らかにし、グルコースによるcrp発現の抑制におけるcrpの自己制御機構の本質的役割を明らかにした。
7)crpに変異がおこりcAMPがなくても活性型になるCRPができるときには、cAMP非存在下においてもグルコース抑制がみられることを再確認した。またこの機構に関してCRPレベルの減少がその要因であることを始めて証明した。
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[Publications] "Mechanism of the down-regulation of cAMP receptor protein by glucose:role of autoregulation of the crp" EMBO J.13. 3077-3082 (1994)
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[Publications] "Role of CRP in transcription activation at E.coli lac promoter:CRP is dispensable after the formation of" Nucl.Acids Res.23(in press). (1995)
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[Publications] "Catabolite repression in E.coli cells lacking cAMP is mediated by fluctuations in CRP levels" Mol.Microbiol.12(in press). (1995)
