1994 Fiscal Year Annual Research Report

核内レセプターによる転写制御機構の解析

Research Project

Project/Area Number	06266218
Research Institution	Tokyo University of Agriculture
Principal Investigator	加藤茂明東京農業大学, 農学部, 助教授 (60204468)
Keywords	核内受容体 / 転写制御 / 遺伝子発現 / 脂溶性リガンド / 転写因子
Research Abstract	核内受容体による転写制御を分子レベルで明らかにすることを目的に複数の視点から解析を進めた。 1)核内受容体の組織特異的転写調節機構の解析核内受容体のAF1の活性は一般に組織特異的かつ構成的であるが、この機構を明かにする目的でこの領域をリン酸化するキナーゼに着目した。今回は、AF1のリン酸化が転写活性を調節することが明らかにされERAF1のリン酸化について詳細に解析した。まずリン酸化部位がMAP kinaseのコンセンサス配列であることから、大腸菌で大量合成したERのAB領域タンパクを用いアフリカツメガエル胚より精製した活性型MAP kinaseによるリン酸化を検討したところ、セリン118が特異的にリン酸化されることを見いだした。次にリン酸化の転写活性への効果を検討する目的で、MAP kinaseの上流に存在するRas cDNAを導入したところ、AF1の転写促進能が増強されることがわかった。 2)核内受容体の標的配列認識の特異性 AGGTCAモチーフはレチノイン酸(RAX,RXR)、ビタミンD(VDR)、甲状腺ホルモン(TR)受容体の標的エンハンサー配列の基本モチーフであり、2個のDirect Repeat型(DR)のAGGTCAモチーフ間の距離を変えることで、標的特異性が生じる。今回はこのモチーフを3個並べた時のDRの標的特異性をCAT assayと精製受容体を用いたin vitro DNA結合実験により調べた。その結果モチーフを3個並べた時には従来報告に有るような標的特異性は消失することがわかった。この他にもいくつかの標的遺伝子のリガンド応答配列の同定、性状を明らかにした。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] H.Sasaki,et al.: "Transcriptional activity of a fluorinated vitamin D analog in VDR-RXR mediated gene expression." Biochemistry. 34. 370-377 (1995)
[Publications] R.Kojima,et al.: "In vivo isomerization of retinoic acid: rapid isomer exchange and gene expression." J.Biol.Chem.269. 32700-32707 (1994)
[Publications] A.Nagasaki,et al.: "Vitamin A regulates the expression of apolipoprotein AI and CIII gene in the rats." Biochem.Biopys.Res.Commun.205. 1510-1517 (1994)
[Publications] Y.Ohyama,et al.: "Identification of a vitamin D-responsive element in the 5'-flanking region of the rat 25-hydroxyvitamin D3 24-hydroxylase." J.Biol.Chem.269. 10545-10550 (1994)
[Publications] H.Mano,et al.: "Positive and negative regulation of retinoid X receptor gene expression by thyroid hormone in the rat." J.Biol.Chem.269. 1591-1594 (1994)
[Publications] M.Okano,et al.: "Retinoic acid up-regulates erythropoietin production in hepatoma cells and vitamin A-depleted rats." FEBS lett.349. 229-233 (1994)
[Publications] 加藤茂明: "核内レセプターと情報伝達" 実験医学バイオサイエンス羊土社, 1-125(125) (1994)
[Publications] 加藤茂明: "受容体の分子生物学" 日本臨床日本臨床社, 17-23(7) (1994)

1994 Fiscal Year Annual Research Report

核内レセプターによる転写制御機構の解析

Principal Investigator

加藤 茂明 東京農業大学, 農学部, 助教授 (60204468)

Research Products

[Publications] H.Sasaki,et al.: "Transcriptional activity of a fluorinated vitamin D analog in VDR-RXR mediated gene expression." Biochemistry. 34. 370-377 (1995)

[Publications] R.Kojima,et al.: "In vivo isomerization of retinoic acid: rapid isomer exchange and gene expression." J.Biol.Chem.269. 32700-32707 (1994)

[Publications] A.Nagasaki,et al.: "Vitamin A regulates the expression of apolipoprotein AI and CIII gene in the rats." Biochem.Biopys.Res.Commun.205. 1510-1517 (1994)

[Publications] Y.Ohyama,et al.: "Identification of a vitamin D-responsive element in the 5'-flanking region of the rat 25-hydroxyvitamin D3 24-hydroxylase." J.Biol.Chem.269. 10545-10550 (1994)

[Publications] H.Mano,et al.: "Positive and negative regulation of retinoid X receptor gene expression by thyroid hormone in the rat." J.Biol.Chem.269. 1591-1594 (1994)

[Publications] M.Okano,et al.: "Retinoic acid up-regulates erythropoietin production in hepatoma cells and vitamin A-depleted rats." FEBS lett.349. 229-233 (1994)

[Publications] 加藤茂明: "核内レセプターと情報伝達" 実験医学バイオサイエンス 羊土社, 1-125(125) (1994)

[Publications] 加藤茂明: "受容体の分子生物学" 日本臨床 日本臨床社, 17-23(7) (1994)

加藤茂明東京農業大学, 農学部, 助教授 (60204468)

[Publications] 加藤茂明: "核内レセプターと情報伝達" 実験医学バイオサイエンス羊土社, 1-125(125) (1994)

[Publications] 加藤茂明: "受容体の分子生物学" 日本臨床日本臨床社, 17-23(7) (1994)