1994 Fiscal Year Annual Research Report
糖鎖分解酵素遺伝子の機能障害の解析と動物モデル作製による糖鎖遺伝子情報の解析
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06267208
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
田中 一 新潟大学, 脳研究所, 助手 (20251845)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
辻 省次 新潟大学, 脳研究所, 教授 (70150612)
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| Keywords | α-N-acetylgalactosaminidase / Shindler病 / Kanzaki病 |
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| Research Abstract |
マウスゲノムDNAライブラリーとしてはstrain129由来のcosmid libraryを用い,プローブとしては我々が既にクローン化してある全長のヒトα-N-acetylgalactosaminidase cDNA(pcD2-HS1225)を用いてスクリーニングを行った。
現在までに,α-N-acetylgalactosaminidaseゲノム遺伝子の全エクソン,及び5′,3′のflanking segmentを含む約40kbpのクローン化を終え,その塩基配列の解析についても11,846bpについて終えている。
マウスのα-N-acetylgalactosaminidase遺伝子の構造は,ヒトのα-N-acetylgalactosaminidase遺伝子と同様に9つのエクソンから構成されていることが明らかにされた。splice donor,splice acceptorについては,すべてGT-AG ruleに従っていた。promoter領域に関しては,TAAT,CAAT-like sequenceは認められなかった。promoter領域の613bpの領域のGC含量は58.1%と高く,house keeping geneとしての特徴を有していた。開始コドンは第1エクソンの3′側から16bpのところにあり,終始コドンは第9エクソンに存在した。poly adenylation signalはTGA codonから495bp下流に認められた。ヒトのα-N-acetylgalactosaminidaseとの比較では,共に9つのエクソンから構成され,タンパクの翻訳領域についても,たとえばエクソン2でその相同性が86.8%であるように,極めて高い相同性が確認された。
以上のように,strain 129由来のマウスα-N-acetylgalactosaminidase遺伝子の全構造を明らかにすることができた。塩基配列を決定したのは11,846bpであるが,その5′側,3′側に十分な長さを有するflanking segmentもクローン化されており,マウスのα-N-acetylgalactosaminidase遺伝子をgene targettingにより破壊するために必要なゲノムDNAのクローン化と構造解析を終了した。今後はこのゲノムDNAを用いて,targetting vectorを構築し,マウスα-N-acetylgalactosaminidase遺伝子のgene targettingによる,Schindler病,Kanzaki病のマウスモデルの作製をめざして研究を進めて行く予定である。
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Research Products
(5 results)
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[Publications] Y.Takiyama et al.: "The gene for Machado-Joseph disease maps to human chromosome 14q." Nature Genetics. 4. 300-304 (1993)
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[Publications] Hajime Tanaka et al.: "Absence of linkage disequilibrium at amyloid precursor protein gene locus in Japanese familial Alzheimer's disease with 717Val→Ile mutation." Nueroscience Letters. 162. 63-66 (1993)
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[Publications] R.Koide et al.: "Unstable expansion of CAG repeat in hereditary dentatorubral-pallidoluysian atrophy (DRPLA)." Nature Genetics. 6. 9-13 (1994)
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[Publications] Sergei N.Illarioshkin et al.: "Trinucleotide repeat length and rate of progression of Huntingtons disease." Ann.Neurol.36. 630-635 (1994)
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[Publications] Hiroshi Ichinose et al.: "Hereditary progressive dystonia with marked diurnal fluctuation caused by mutations in the GTP cyclohydrolase I gene." Nature Genetics. 8. 236-242 (1994)
