1994 Fiscal Year Annual Research Report
二価金属イオンによる8‐ヒドロキシグアニン生成と突然変異生成
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06271205
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
山本 和生 東北大学, 理学部, 教授 (20093536)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
赤阪 進 大阪府立公衆衛生生成衛研, 労働衛生部, 主任研究員 (10158719)
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| Keywords | 活性酸素 / 突然変異 / 鉄イオン / pZ189プラスミド / 8‐ヒドロキシグアニン / ファピ- / 大腸菌mutM変異株 / トランスバ-ジョン変異 |
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| Research Abstract |
1)鉄イオンの突然変異原性の解析;
塩化第一鉄をDNA二本鎖pZ189プラスミドと反応させ、野生型およびmutM変異大腸菌に感染し、supF遺伝子の突然変異体を得た。突然変異頻度は、野生株の場合自然変異の20倍、mutM変異では30倍であった。G:C_<‐>>T:A及びG:C_<‐>>C:Gトランスバ-ジョンが増大していた。
2)鉄イオンによる8‐ヒドロキシグアニンの同定;
塩化第一鉄で処理したpZ189のDNAをP1ヌクレアーゼで消化し、燐酸化し、高速区液体クロマトグラフィーに接続した電気化学検出器を用い、活性酸素型損傷、8-ヒドロキシグアニン、の生成割合を調べた。塩化第一鉄濃度の増加にともない生成量は増加し、120μM塩化第一鉄処理で10^5グアニン当たり50個の8-ヒドロキシグアニンが作られていた。塩化第一鉄によるこの変化は、カタラーゼやSODにより部分的に阻害された。
3)まとめ;
鉄イオンによる変異原性は、環境中の微量の過酸化水素やスーパーオキサイドとの反応で生成する活性酸素によるDNA損傷、8-ヒドロキシグアニンやファピ-、の生成に起因する。また、従来変異原性について言及のないファピ-についても、変異誘発の可能性、とりわけG:C_<‐>>C:Gトランスバ-ジョンの原因損傷である可能性を強く示唆した。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Susumu Akasaka and Kazuo Yamamoto: "Mutational specificity by active oxygens in supF gene of Escherichia coli." in International Congress Series(eds.K.Asada). 283-284 (1994)
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[Publications] Kouichi Takimoto,Kazuo Yamamoto,et.al: "Spectrum of proton-induced mutagenesis of Escherichia coli crp gene." Mutation Research. 314. 1-9 (1994)
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[Publications] Susumu Akasaka and Kazuo Yamamoto: "Hydrogen peroxide induces G:C to T:A and G:C to C:G transversion in the supF gene of Escherichia coli." Molecular and General Genetics. 243. 500-505 (1994)
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[Publications] Susumu Akasaka and Kazuo Yamamoto: "Mutagenesis resulting from DNA damage by lipid peroxidation in the supF gene of Escherichia coli." Mutation Resesarch. 315. 105-112 (1994)
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[Publications] Tatsuo Nakano,Kazuo Yamamoto,et al: "Mutation of a shuttle vector plasmid,pZ189,in Escherichia coli induced by a-particles(Boron neutoron captured beam:BNCB)." Mutation Research. (in press).
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[Publications] Kouki Kitamura,Kazuo,Yamamoto,et al: "DNA sequence changes in mutation in the tonB gene on the chromosome of Escherichia coli K12." Japanese Jounal of Genetics. (in press).
