1994 Fiscal Year Annual Research Report
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06271235
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
酒井 裕 京都大学, 農学部, 助教授 (60089117)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
駒野 徹 京都大学, 農学部, 教授 (30026413)
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| Keywords | 殺虫性蛋白質 / Bacillus thuringiensis / 害虫防除 / 環境保全 / 双翅目昆虫 / ラン藻 / 遺伝子発現調節 / プロモータ |
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| Research Abstract |
グラム陽性菌Bacillus thuringiensisの亜種の一つisraelensis(Bti)が産生する殺虫性蛋白質の遺伝子cryIVAでは2つのプロモータP1及びP2によって、またcryIVBではプロモータPによって転写が行われることを明らかにした。枯草菌の胞子形成変異株を用いて調べたことろ、これらの転写は、σ^E(Bt相同物はσ^<35>)、転写因子SpolllD(Bt相同物はSpolllD-Bt)、σ^K(Bt相同物はσ^<28>)及びσ^H(Bt相同物はσ^H-Bt)に依存して複雑な調節を受けることを明らかにした。とりわけcryIVAの転写調節はBtの他の種類の殺虫性蛋白質遺伝子には見られない複雑なものであることが判明した。これらの調節過程に関与するσ^H及びSpolllDのBt相同物の遺伝子をクローン化しその存在を示すことができた。
Btが産生する殺菌性蛋白質の殺虫効果を有する領域にはアミノ酸配列が高度に保持されている5つの区域block1,2,3,4及び5が存在する。block1と4は殺虫活性の決定に関与することが明らかにされたが、その他の区域の役割は未だ明らかではなかった。本研究ではCryIVAのblock5が殺虫活性の決定に直接関与するのではなく、130kDa CryIVA蛋白質分子の安定性を決定する重要な要素で有ることを明らかにすることができた。
ラン藻にcryIVA遺伝子を導入して形質転換株の作成を試みた。cryIVA遺伝子を保持する発現ベクターpFXをSynechocystis PCC6803に導入して形質転換体と思われるクローンを得ることができた。
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[Publications] 駒野徹: "Functional analysis of block 5,one the highly conserved amino asid sequences in the 130-kDa CrylVA protein produced by Bacillus thuringiensis subsp." FEBS Letters. 384. 249-254 (1994)
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[Publications] 酒井裕: "Molecular cloning and characterization of a Bacillus thuringiensis homolog of the spolllD gene from Bacillus subtills" Gene. (印刷中). (1995)
